兩個人類新基因TRPT1和PGL29的結(jié)構(gòu)及功能分析.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文兩個人類新基因TRPT1和PGL29的結(jié)構(gòu)及功能分析姓名：胡千德申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：李育陽20030515P I T l 3 蛋白之間存在著相互作用，說明7 艫“基因除了參與t R N A 剪接之外，還可能具有其它方面的功能，有待進(jìn)一步研究。在T R P T l 與P I T l 3 的相互作用中，通過系列缺失方法，證明了T R P T l 的功能區(qū)( 即P I T l 3 的作用區(qū)) 位于其氨基

2、酸序列的8 0 —2 2 0 a a 之間，基本上位于D U F 6 0功能域內(nèi)。同時，對P I T l 3 的功能區(qū)也進(jìn)行了初步測定，在其氨基酸序列的5 5 —1 l O a a 之間為可能的功能位點。用來自成人的1 2 種不同組織的分析結(jié)果表明，T R P T l 基因的表達(dá)具有組織特異性差異。其在骨胳肌、心臟中的表達(dá)量最為豐富，在其它組織中的表達(dá)較低或者不表達(dá)。據(jù)此，我們推測，人體內(nèi)的兩種t R N A 剪接方式可能也存在著組織差

3、異，即：一種剪接方式存在于某些組織中，而另一種剪接途徑可能存在于其它組織中。T R P T l 與G F P 融合蛋白在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)結(jié)果，顯示T R P T l 主要分布在細(xì)胞核內(nèi)，這與其具有的參與t R N A 剪接成熟的功能是相符合的。利用T R P T l 及其多種同源性蛋白進(jìn)行的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明，它們能夠?qū)碜圆煌蛘呦嗤惾旱奈锓N按照進(jìn)化關(guān)系正確地區(qū)分開來。因此，T R P T l 蛋白可以作為一種進(jìn)化標(biāo)汜蛋白，用來反映物種

4、間的親緣關(guān)系。f { [ T L 2 9 的全長c D N A 序列為1 6 9 8 b p ，含有一個編碼2 6 0 a a 的O R F ，編碼蛋白的分子量為2 8 ．6 k D a ，等電點為5 ．0 7 。P G L 2 9 基因定位于染色體1 6 p 1 3 ．3 區(qū)，整個基因長度4 ．O k b 左右。由8 個外顯子和7 個內(nèi)含子組成。在P G L 2 9 的編碼蛋白中，共有4 個W D 4 0 結(jié)構(gòu)域。其全長氨基酸序列與模

5、式生物釀酒酵母中的L s t 8 p有4 4 ％的同源性。根據(jù)P 6 L 2 9 表達(dá)菌株對各種氨基酸類似物的抗性測定結(jié)果，發(fā)現(xiàn)P O L 2 9 與L S T 8 并無明確的互補關(guān)系。酵母雙雜交篩選結(jié)果，也未得到特異地與P G L 2 9 相互作用的蛋白質(zhì)分子，因而現(xiàn)有的實驗無法確定該基因的功能。為此，對實驗的方法、材料選擇及相關(guān)基因的背景等方面作了討論。關(guān)鍵詞： 聊7 ' ，， 鏟刀，t R N A 剪接， 基因功能互補，p