水稻兩個miRNA靶基因功能分析載體的構建及遺傳轉化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、稻瘟病作為水稻三大病害之一，是嚴重影響水稻生產(chǎn)的重要病害。目前研究表明，植物中的miRNA可以調(diào)控植物的生長發(fā)育，生物和非生物脅迫，以及抗性反應。但是其中針對miRNA調(diào)節(jié)水稻和稻瘟病菌互作的研究報道很少，本實驗室鑒定出了兩個正調(diào)稻瘟病抗性的miRNA: miRNA398和miRNA160，并且他們可能是通過抑制靶基因的轉錄來調(diào)控稻瘟病抗性。為了研究miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os0

2、4g48410的生物學功能，驗證靶基因LOC_Os06g47150與miRNA160的關系、靶基因LOC_Os04g48410與miRNA398的關系，并進一步闡釋miRNA398和miRNA160的調(diào)控網(wǎng)絡的研究做準備。本課題通過構建miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410過表達載體，過表達突變載體，以及RNAi載體，并遺傳轉化水稻獲得了相應材料。
　　本研究中，首先

3、是構建miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410過表達載體，通過注射本生煙觀察這兩個基因的亞細胞定位，發(fā)現(xiàn)靶基因LOC_Os04g48410主要在細胞膜上表達，而靶基因LOC_Os06g47150主要在細胞核中表達。其次是構建miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410過表達突變載體，并通過農(nóng)桿菌介導方法轉化水稻，經(jīng)潮霉

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