兩個編碼C2H2型鋅指蛋白新基因的克隆、表達及初步功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鋅指蛋白結(jié)構(gòu)域是蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合模體(motif)中非常重要的一種,在許多轉(zhuǎn)錄因子中含有鋅指DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域.人紅白血病(Humanerythroleukemiacellline,HEL)細胞系在不同的誘導劑(Hemin與PMA)的作用下可以分別向紅系和巨噬細胞兩個方向分化,這種分化本質(zhì)上是依靠基因的特定表達實現(xiàn)的,其中就有鋅指結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白可能在發(fā)揮重要作用.為研究造血細胞分化,特別是紅系分化過程可能涉及的新基因,該文先分別用H

2、emin和PMA誘導HEL細胞分化,提取RNA,反轉(zhuǎn)錄成cDNA,再根據(jù)鋅指結(jié)構(gòu)域部分氨基酸的保守序列,設計出簡并PCR擴增引物,對其cDNA進行擴增,獲得22個編碼鋅指細胞的EST.經(jīng)GenBank數(shù)據(jù)庫中比較后,確定其中5個為已知蛋白編碼基因EST的序列,17個為新的鋅指蛋白編碼基因EST,在GenBank注冊(登錄號為:BE240813~BE240828).選擇兩個新EST篩選人骨髓細胞cDNA文庫,獲得兩個新的鋅指蛋白編碼基因的

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