3T3-L1細(xì)胞在不同糖脂水平中的分化與insig2基因的作用.pdf

1、目的：觀察胰島素誘導(dǎo)基因2(insulin-induced gene2,insig2)在不同糖脂水平誘導(dǎo)3T3-L1細(xì)胞分化中的作用,探討insig2在脂肪細(xì)胞分化中的作用。
　　方法：體外培養(yǎng)3T3-L1細(xì)胞(Tc)、轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)的3T3-L1細(xì)胞(Kc)及轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)-insig2的3T3-L1(Ic)細(xì)胞,分別置于高糖高脂(SF)、單純高糖對(duì)照(S)、低糖高脂(F)、單純低糖對(duì)照(D)的環(huán)境中分化

2、培養(yǎng)12天,油紅O染色后計(jì)算染色陽性細(xì)胞面積,RT-PCR法測(cè)定insig2、脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白2(adipocyte fattyacid-binding protein2,aP2)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterol regulatoryelement-binding protein,SREBP)mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：同種細(xì)胞在高糖的分化環(huán)境中,高脂與單純高糖對(duì)照處理后相比較,染色陽性細(xì)胞面積、aP2、insig2、

3、SREBP mRNA表達(dá)均無顯著差別(P>0.05);同種細(xì)胞在低糖的分化環(huán)境中,高脂與單純低糖對(duì)照處理后相比較,前者的染色陽性細(xì)胞面積、aP2、insig2、SREBPmRNA表達(dá)均較后者顯著升高(P<0.05);在四種分化環(huán)境中,分化前后轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)-insig2的3T3-L1細(xì)胞中insig2基因持續(xù)高表達(dá),且誘導(dǎo)分化第12天染色陽性細(xì)胞面積、aP2、SREBP mRNA表達(dá)均較對(duì)照組3T3-L1細(xì)胞及轉(zhuǎn)染pcDNA

4、3.1(+)的3T3-L1細(xì)胞顯著下調(diào)(P<0.05);3T3-L1細(xì)胞組與轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)的3T3-L1細(xì)胞組比較,分化前后染色陽性細(xì)胞面積、aP2、insig2、SREBP mRNA表達(dá)均無顯著差別(P>0.05)。
　　結(jié)論：1.高糖和/或高脂即可促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化,而低糖低脂不利于脂肪細(xì)胞的分化2.insig2在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平與脂肪細(xì)胞成熟及分化程度相關(guān),與分化環(huán)境中糖脂濃度有一定關(guān)系;3.3T3-L1細(xì)胞在任何