防己黃芪湯對小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化及炎癥因子基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　1.觀察防己黃芪湯對小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響；
　　2.觀察防己黃芪湯對小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中炎癥因子MCP-1、IL-6、TNF-αmRNA表達(dá)的影響。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞，在細(xì)胞融合后2天，用傳統(tǒng)“雞尾酒”法（即含胰島素、地塞米松、異丁基-3-甲基黃嘌呤的混合誘導(dǎo)劑）誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞。在誘導(dǎo)分化的第0天，設(shè)置溶媒對照組（

2、1 mol/L PBS）和藥物處理組（100μg/ml防己黃芪湯）。
　　1.在成功誘導(dǎo)分化的第10天，用油紅O染色，拍照觀察，用異丙醇溶解油紅O，使用酶標(biāo)儀進行定量檢測各組A492nm以間接反映3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化程度及細(xì)胞內(nèi)甘油三酯小脂滴含量。
　　2.在成功誘導(dǎo)分化的第10天，提取細(xì)胞總RNA，采用real-time PCR法檢測3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因，過氧化物酶體增殖受體γ（PPARγ）、脂聯(lián)素（a

3、diponectin） mRNA的表達(dá)情況。
　　3.在成功誘導(dǎo)分化的第10天，提取細(xì)胞總RNA，采用real-time PCR法檢測3T3-L1脂肪細(xì)胞炎癥因子，MCP-1、IL-6、TNF-αmRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.油紅O染色顯示藥物處理組（100μg/ml防己黃芪湯）中含有甘油三酯小脂滴的成熟脂肪細(xì)胞少于溶媒對照組（1 mol/L PBS），P<0.05。
　　2.在誘導(dǎo)分化的第10天，藥

4、物處理組（100μg/ml防己黃芪湯）的PPARγmRNA（P<0.005）、脂聯(lián)素mRNA（P<0.005）明顯低于溶媒對照組（1 mol/L PBS）。
　　3.在誘導(dǎo)分化的第10天，藥物處理組（100μg/ml防己黃芪湯）的MCP-1 mRNA（P<0.05）、TNF-αmRNA（P<0.005）明顯低于溶媒對照組（1 mol/L PBS），IL-6 mRNA表達(dá)兩組無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1.通過定性分