薯蕷皂苷保護(hù)缺血心肌的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的： 研究薯蕷皂苷(Dioscin)在心肌缺血再灌注損傷(Myocardialischemical/reper-fusion injury)情況下對大鼠血小板活化功能的影響；研究薯蕷皂苷對血管緊張素II誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大(cardiomyocyte hypertrophy)及相關(guān)信號蛋白表達(dá)。從而探討薯蕷皂苷保護(hù)缺血心肌的分子機(jī)制。 方法： 1.健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對照組，缺血再灌注組，薯蕷皂苷低劑

2、量組(150mg/kg，DL)和高劑量組(250mg/kg，DH)，流式細(xì)胞術(shù)檢測血漿P-選擇素(CD62p)，溶酶體顆粒糖蛋白(CD63)表達(dá)百分率，ELISA法測定血漿的血小板活化因子(PAF)濃度。 2.采用體外培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞，加入血管緊張素II誘導(dǎo)其肥大，同時(shí)以不同的濃度(10μmol/ml，20μmol/ml，40μmol/ml)薯蕷皂苷干預(yù)，考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白含量，相差顯微鏡測量細(xì)胞大小，并通過免疫印跡法觀察p3

3、8和絲裂原激活蛋白激酶的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1.薯蕷皂苷對心肌缺血再灌注損傷的影響：與缺血再灌注模型組相比，薯蕷皂苷各劑量組心肌損傷明顯減輕，心肌間質(zhì)充血不明顯，心肌纖維輕度混濁變性，未見心肌斷裂。心律失常發(fā)生率：模型組組(85.71％)，空白對照組(0％)，DH組(0％)和DL組(12.5％)，與IR組比較有顯著性差異(P<0.01)，DH和DL組之間無顯著性差異。 2.P-選擇素表達(dá)(CD62p)百分率：與空

4、白對照組比較，缺血再灌注組CD62p表達(dá)增加(9.23±3.06vs20.30±9.18％，p<0.05)，薯蕷皂苷預(yù)處理的兩組較缺血再灌注組顯著下降(20.30±9.18vs12.15±4.65％，20.30±9.18vs10.01±3.05％，p<0.05)。薯蕷皂苷各劑量組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.溶酶體顆粒糖蛋白(CD63)表達(dá)百分率：與空白對照組比較，缺血再灌注組CD63表達(dá)增加(5.25±2.11vs18.72

5、±7.14％，p<0.05)，薯蕷皂苷高濃度組較缺血再灌注組表達(dá)率下降(18.72±5.14vs14.79±4.13，p<0.05)，低濃度組與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.血漿血小板活化因子(PAF)濃度：與空白對照組比較，缺血再灌注組PAF表達(dá)增加(8.2±2.34vs20.79±6.37ng/ml，p<0.05)，薯蕷皂苷高劑量組較缺血再灌注組表達(dá)率下降(20.79±6.37vs15.17±2.50，p<0.05)，低

6、劑量組與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.細(xì)胞總蛋白含量：與空白對照組比較，AngII組心肌細(xì)胞蛋白含量增加(53.41±3.42vs96.42±3.95，p<0.01)；與AngII組比較，薯蕷皂苷各劑量組蛋白含量均下降(63.27±1.56vs96.42±3.95，55.06±2.88vs96.42±3.95，50.50±1.41vs96.42±3.95μg/w，p<0.05)。薯蕷皂苷中、高劑量組與空白對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義。 6.p38表達(dá)：與空白對照組比較，AngII組心肌細(xì)胞p38蛋白含量增加(182.75±10.44vs114.07±8.36％，p<0.01)，與AngII組比較，薯蕷皂苷各劑量組蛋白含量均下降(160.36±17.29vs182.75±10.44，125.21±11.54vs182.75±10.44120.90±9.25vs182.75±10.44％，p<0.05)。薯蕷皂苷高劑量組與空白對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

8、 7.絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的表達(dá)：AngII組心肌細(xì)胞MKP-1蛋白含量減少(64.24±6.71vs124.44±9.65％，p<0.01)；與AngII組比較，薯蕷皂苷中、高劑量組蛋白含量均升高(118.12±9.04vs64.24±6.71，86.38±7.22vs64.24±6.71％，p<0.05)。 結(jié)論： 1.薯蕷皂苷能抑制缺血再灌注損傷期間的血小板活化，從而減少血栓形成，保護(hù)