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文檔簡介
1、目的:選擇抗氧化損傷活性評價百尾參的藥效,明確百尾參的藥效物質(zhì),并提升其質(zhì)量標準。
方法:通過70%乙醇提取,D101大孔樹脂柱層析,獲得百尾參水組分、70%乙醇組分和90%乙醇組分,以過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)PC12細胞氧化損傷模型作為體外抗氧化損傷評價模型,篩選出百尾參抗氧化損傷有效組分,對其可能的作用機制進行初步探討;采用MCI、Sephadex LH-20、正反相硅膠柱層析等分離純化手段對百尾參化學(xué)成分進行研究,并采用
2、 UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)對化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定,并對部分分離得到的化合物進行抗氧化損傷活性評價;同時,采用UHPLC-DAD建立百尾參指紋圖譜方法,并依據(jù)相關(guān)規(guī)定對30批藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分、重金屬及有害元素和有機氯農(nóng)藥殘留等與質(zhì)量有關(guān)的檢查項目進行研究。
結(jié)果:百尾參70%乙醇組分和90%乙醇組分能夠保護 H2O2對PC12細胞造成的氧化損傷。利用現(xiàn)代的分離技術(shù)對活性較強且成分較豐富
3、70%乙醇組分進行研究,從中分離鑒定了20個化合物。藥理研究表明,部分化合物均具有抗氧化損傷活性。此外,通過對指紋圖譜研究,利用相似度軟件,聚類分析和主成分分析等統(tǒng)計方法建立百尾參藥材指紋圖譜研究方法,結(jié)果顯示其相似度在0.7~0.9,聚類分析將30批樣品指紋圖譜分為4類,且主成分分析提示1號峰和Disporumone A為百尾參質(zhì)量控制中的關(guān)鍵性指標;其它質(zhì)量相關(guān)的研究結(jié)果顯示,百尾參水分、總灰分、酸不溶性灰分分別不得超過14.0%、
4、6.0%、2.0%;百尾參中鉛、鎘、銅、砷、汞含量均符合外貿(mào)易經(jīng)濟合作部“藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準”;百尾參均未檢出9種有機氯殘留農(nóng)藥。
結(jié)論:70%乙醇組分和90%乙醇組分是百尾參的抗氧化損傷主要有效組分。它們能通過保護細胞免受氧化損傷并直接清除氧化自由基離子而對炎癥細胞的產(chǎn)生保護作用。在所分離鑒定的化合物中,Disporumone A(4)為一新化合物;(E)-4-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-3-丁烯-2-酮(1
5、)、丁香醛(2)、香草醛(3)、覆盆子酮(5)、4',5-二羥基-3,6,7-三甲氧基黃酮(6)、4-(對羥基苯基)-3-丁烯-2-酮(8)、貓眼草酚(10)、dihenzo[b,f][l,5]dioxocin(12)、4-羥基苯乙酮(13)、紫丁香酸(15)、fareanol(16)、沒食子酸乙酯(20)、4-hydroxy-2-methoxyphenyl-6-deoxy-α-L-talopyranoside(21)、(β,s)-Be
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