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文檔簡介
1、[目的]
通過對清潔級昆明種小鼠腹腔聯(lián)合注射D-半乳糖和AlC13及D-半乳糖和NaNO2復制兩種類阿爾茨海默病動物模型,觀察阿爾茨海默病小鼠模型中腦組織海馬區(qū)神經元形態(tài)學變化;探討B(tài)cl-2、VEGF在阿爾茨海默病動物模型中的變化情況,并進一步分析阿爾茨海默病時其表達的相關性;為進一步聯(lián)合治療奠定理論基礎。
[方法]
80只清潔級昆明小鼠雌雄各半,體重18~22g,小鼠標準適應性喂養(yǎng)一周后,按
2、照隨機對照表隨機分成4組,A:對照組1;B:對照組2;C:D-半乳糖+AlCl3組;D:D-半乳糖+NaNO2組;C組給予腹腔注射D-半乳糖90mg/(kg·d)(生理鹽水配制)以及AlCl340mg/(kg·d)(雙蒸水配制)90天;A組給予相同劑量的生理鹽水和雙蒸水腹腔注射;D組給予腹腔注射10g/L D-半乳糖120 mg/(kg·d)(生理鹽水配制)以及NaNO290mg/(kg·d)(雙蒸水配制)60天;B組給予相同劑量的生理
3、鹽水和雙蒸水腹腔注射;到期后處死小鼠并收集海馬組織,海馬組織病理標本行蘇木素-伊紅(HE)染色及尼氏染色觀察小鼠腦組織雙側海馬區(qū)神經元細胞病理形態(tài)學改變。免疫組織化學法(IH)檢測各組小鼠腦組織雙側海馬區(qū)Bcl-2和VEGF的表達。
[結果]
1.小鼠一般狀況改變:給藥8周后,C組小鼠出現(xiàn)反應遲鈍,體重增加緩慢;D組小鼠明顯反應遲鈍,體重不增或降低,部分毛發(fā)缺失,稍微弓背,精神稍微萎靡,毛色黃且干澀,攝食減少
4、。給藥12周后,C組小鼠出現(xiàn)類似D組小鼠8周時的行為學改變。
2.腦組織海馬區(qū)病理改變2.1.蘇木素-伊紅(HE)染色:對照組雙側海馬區(qū)神經元形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形,排列緊密,胞核居中,核仁清晰,胞質豐富。C組雙側海馬區(qū)多數(shù)神經元細胞皺縮、形態(tài)不規(guī)則,數(shù)目減少,排列疏松,核染色質邊集,并在少數(shù)神經元細胞周邊出現(xiàn)較多核碎片。D組雙側海馬區(qū)多數(shù)神經元形態(tài)規(guī)則,核仁尚清晰,核染色質邊集,胞質略有減少,并發(fā)現(xiàn)少數(shù)神經元細胞萎縮或
5、空囊泡狀改變。
2.2.尼氏染色(Nissl's staining):對照組雙側海馬區(qū)神經元形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形,排列緊密,核仁清晰,神經元細胞樹突、軸突及尼氏小體都清晰可見,胞質豐富,微細結構清晰可見。C組雙側海馬區(qū)神經元形態(tài)極不規(guī)則,排列明顯稀疏,數(shù)目顯著減少,大小各異,胞核、尼氏小體、樹突、軸突難以識別。D組雙側海馬區(qū)神經元形態(tài)不規(guī)則,數(shù)目減少,大小不一,排列疏松,胞核、尼氏小體、樹突、軸突模糊不清。
6、 3.各組腦組織海馬區(qū)神經元數(shù)目的變化情況 C組和D組腦組織海馬區(qū)神經元數(shù)目與正常對照組相比顯著減少(P<0.05),各組自身左側與右側腦組織海馬區(qū)相比神經元數(shù)目減少無顯著性差異(P>0.05)。
4.免疫組化(Immunohistochemical)檢測各組腦組織雙側海馬區(qū)Bcl-2和VEGF的表達與對照組相比,C組和D組腦組織海馬區(qū)神經元Bcl-2及VEGF陽性細胞數(shù)顯著減少(P<0.05),各組自身左側與右側腦組織
7、海馬區(qū)相比神經元Bcl-2及VEGF陽性細胞數(shù)無顯著差異(P>0.05)。
5.各組雙側腦組織海馬區(qū)Bcl-2/VEGF陽性細胞數(shù)相關性各組腦組織海馬區(qū)Bcl-2/VEGF陽性細胞數(shù)無明顯相關性;各組自身左側與右側腦組織海馬區(qū)Bcl-2/VEGF陽性細胞數(shù)無相關性(P>0.05)。
[結論]
阿爾茨海默病動物模型中雙側腦組織海馬區(qū)神經元有顯著形態(tài)學變化;雙側海馬區(qū)Bcl-2、VEGF陽性細胞數(shù)顯
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