大青葉中黃酮化合物的分離鑒定和含量測定方法研究.pdf

1、以大青葉為研究對象,利用硅膠柱色譜法、聚酰胺柱色譜法、Sephadex LH-20柱色譜法、制備高效液相色譜法及反復(fù)重結(jié)晶等手段對其黃酮化合物進(jìn)行分離純化,并應(yīng)用化學(xué)性質(zhì)和質(zhì)譜、波譜分析方法對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,共分離并鑒定了8個黃酮類化合物:異金雀花素(化合物1)、異金雀花素-3"-O-吡喃葡萄糖苷(化合物2)、異牡荊素(化合物3)、異牡荊素-3”-O-吡喃葡萄糖苷(化合物4)、異葒草苷-3”-O-吡喃葡萄糖苷(化合物5)、異牡荊素-6”

2、-O-吡喃葡萄糖苷(化合物6)、異葒草苷(化合物7)和肥皂草苷(化合物8)。其中,化合物1、2、4、6、7和8為首次從菘藍(lán)中分離得到；化合物5為新化合物。
　　 采用紫外-可見分光光度法,以蘆丁為對照品,建立大青葉總黃酮的含量測定方法。結(jié)果蘆丁在11.56～57.60μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9998),平均回收率為100.2％(RSD=1.4％)。采用正交試驗設(shè)計法,以大青葉總黃酮含量為評價指標(biāo),對大青葉總黃酮

3、的樣品制備方法進(jìn)行考察,確定最佳樣品制備方法為用20倍量的60％g~醇,超聲提取4次,每次30 min。
　　 使用SOD試劑盒,對8個黃酮化合物及大青葉總黃酮提取液體外清除超氧陰離子自由基的能力進(jìn)行測定,評價它們的抗氧化活性。結(jié)果8個黃酮化合物及大青葉總黃酮提取液均有不同程度的抗氧化活性。
　　 建立了同時測定大青葉中6種黃酮類成分:異金雀花-3”-O-吡喃葡萄糖苷、異牡荊素-3"-O-吡喃葡萄糖苷、異葒草苷-3"-O

4、-吡喃葡萄糖苷、異金雀花素、異牡荊素和異葒草苷的毛細(xì)管電泳分析方法。異金雀花-3"-O-吡喃葡萄糖苷、異牡荊素-3"-O-吡喃葡萄糖苷、異葒草苷-3”-O-吡喃葡萄糖苷、異金雀花素、異牡荊素和異葒草苷濃度分別在33.0～660μg·mL-1、10.0～200μg·mL-1、14.5～290μg·mL-1、27.5～550μg·mL-1、33.0～660μg·mL-1和12.0～240μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。方法回收率