脫管散混懸液對(duì)金黃色葡萄球菌致大鼠慢性創(chuàng)面干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:評(píng)定脫管散混懸液對(duì)慢性創(chuàng)面金黃色葡萄球菌的抑菌作用和促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用,并探討其可能的作用機(jī)理。
　　方法:
　　1、制備標(biāo)準(zhǔn)菌液將金黃色葡萄球菌(ATCC25933)進(jìn)行復(fù)蘇、接種、傳代、培養(yǎng)等制成濃度為1×109cfu/ml的標(biāo)準(zhǔn)菌液。
　　2、動(dòng)物造模、分組及處理健康雄性清潔級(jí)Wistar大鼠108只,全部采用“皮膚缺損+細(xì)菌感染+激素干預(yù)”的方法制成大鼠慢性創(chuàng)面模型,造模成功后行隨機(jī)化分組,分為:A組(實(shí)驗(yàn)

2、組)、B組(陽性對(duì)照組)和C組(模型組),每組36只。A組用浸有l(wèi)ml脫管散混懸液(0.005g/ml)的邊長為3cm×4cm的長方形紗布外敷換藥;B組用浸有l(wèi)ml稀碘伏(0.4％)的邊長為3cm×4cm的長方形紗布外敷換藥;C組用浸有l(wèi)ml生理鹽水的邊長為3cm×4cm的長方形紗布外敷換藥。各組大鼠經(jīng)換藥后,均用三層無菌紗布覆蓋,外套自制鋼絲網(wǎng)罩固定,用同樣的方法每日換藥1次。
　　3、觀測指標(biāo)觀測大鼠一般情況、創(chuàng)面愈合時(shí)間,并

3、于用藥后第1,3,7,10,14和21天,六個(gè)時(shí)間段測定各組創(chuàng)面愈合率,創(chuàng)面分泌物PH值,同時(shí)各組隨機(jī)選取6只大鼠處死,取痂下組織行菌量測定,并另切取部分組織進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)(HE染色)觀察,及通過免疫組織化學(xué)方法觀測以上6個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組創(chuàng)面中表皮生長因子(EGF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)情況。
　　4、統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS19.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn),所有統(tǒng)計(jì)分析方法均以P<0

4、.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01為有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。
　　結(jié)果:
　　1、 A組大鼠在治療過程中其活動(dòng)、進(jìn)食狀況、創(chuàng)面及周圍炎癥和分泌物情況以及肉芽組織生長等大體情況較B、C兩組優(yōu)越。
　　2、各組大鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間:A組平均愈合天數(shù)為13.84±1.08d,均少于B組16.11±1.39d和C組20.63±1.25d,與B、C兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為P<0.05和P<0.01);B組與C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、顯著性差異(P<0.01)。
　　3、各組創(chuàng)面愈合率:在第3、10天,A、B兩組與C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01);第7、10天:A組創(chuàng)面愈合率高于C組,兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01),同時(shí)A組與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);第14天A組創(chuàng)面愈合率仍高于C組,兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01)。
　　4、創(chuàng)面分泌物PH值檢測結(jié)果:在第3天時(shí),A、B兩組創(chuàng)面分泌物PH值均低于C組,與C

6、組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為P<0.01和P<0.05),A組與B組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01);在第7天,A組與B、C兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為P<0.01和P<0.05)。
　　5、創(chuàng)面組織細(xì)菌學(xué)檢測結(jié)果:在第1、14天,A組創(chuàng)面痂下組織菌量低于C組,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在第3、7、10天,A組與C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01),B組與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)

7、;在第3天A組與B組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01);第7、10天A組與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　6、創(chuàng)面組織病理學(xué)觀察:用藥后第1天,各組炎癥反應(yīng)均較明顯;第3天,A組較 B、C組創(chuàng)面滲出明顯,見炎性細(xì)胞浸潤帶及成纖維細(xì)胞,巨噬細(xì)胞增生明顯;第7—10天,A組和B組創(chuàng)面分別有較多肉芽組織充填,A組中成纖維細(xì)胞數(shù)量較多、體積大,毛細(xì)血管豐富,可見散在膠原纖維,這些變化較B、C兩組為明顯;第14天,A組成

8、纖維細(xì)胞數(shù)量明顯減少,新生膠原纖維粗大,開始出現(xiàn)少量新生毛囊上皮與其他皮膚附屬器,創(chuàng)面大部分被新生的表皮覆蓋,此情況較較 B、C兩組優(yōu)越;第21天,A、B兩組創(chuàng)口基本愈合,被肉芽組織充填并有新生表皮覆蓋,A組間質(zhì)中可見大量排列整齊的膠原纖維,簇集或束狀排列,情況較B、C組為好。
　　7、免疫組化觀察EGF的表達(dá)變化情況:不同時(shí)間段EGF表達(dá)的平均光密度比較:第3、14天,A組與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);第14天,A

9、組與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);第10天,A組與C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01)。不同時(shí)間段EGF表達(dá)的平均灰度比較:第10、14天,A組與B、C兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　8、免疫組化觀察VEGF的表達(dá)變化情況:不同時(shí)間段VEGF表達(dá)的平均光密度比較:第3、7、10天,A組與C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01);第7、10天,A組與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。不同

10、時(shí)間段VEGF表達(dá)的平均灰度比較:第3、7天,A組與B、C兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、脫管散混懸液對(duì)慢性創(chuàng)面中金黃色葡萄球菌有抑菌作用。
　　2、脫管散混懸液可以改變慢性創(chuàng)面分泌物的PH值,酸化創(chuàng)面。
　　3、脫管散混懸液可調(diào)節(jié)慢性創(chuàng)面愈合過程中EGF、VEGF的表達(dá)。
　　4、脫管散混懸液能夠促進(jìn)慢性創(chuàng)面的愈合,其促愈機(jī)制可能與其酸化創(chuàng)面、抑制創(chuàng)面細(xì)菌生長及適時(shí)上調(diào)慢