基于代謝組學的莪術類藥材的質(zhì)量控制.pdf

1、中藥是中醫(yī)防病治病的主要形式和手段,是我國人們長期臨床用藥的經(jīng)驗總結。然而由于中藥來源廣泛、后繼處理儲存的形式多樣,使得中藥的質(zhì)量控制和評價一直是中藥現(xiàn)代化研究的關鍵問題之一。本課題以我國較常用的中藥材莪術(包括溫莪術、蓬莪術及廣西莪術)為研究對象,基于代謝組學方法研究不同植物來源的莪術的質(zhì)量控制和評價方法,并考察了新鮮和干燥藥材的抗氧化和抗菌活性.主要內(nèi)容包括:
　　 1)應用GC-MS和HPLC的代謝組學方法研究不同生長時期

2、溫莪術的代謝物輪廓,結合PCA等模式識別方法獲取溫莪術生長代謝輪廓特征,結果顯示溫莪術的不同生長時期代謝特征存在顯著差異,PCA分析顯示溫莪術生長可以大致分為4個時期,其整個生長時期的代謝輪廓特征形成一個近似閉合的代謝循環(huán)。此外,應用HPLC檢測了溫莪術提取物中主要活性組分β-欖香烯、姜黃素、莪術醇、莪術二酮和吉馬酮在不同生長時期的含量積累,結果顯示這幾個活性組分在9月間含量較高,但此時藥材干燥后質(zhì)量較輕,若考慮不同時期藥材的干重,則以

3、每年12月至次年1月間較為合適,這與莪術生長代謝模式特征基本一致。因此本文建立的方法可用來確定溫莪術最佳采集時間和辨別商品藥材的采集時間。
　　 2)基于GC-MS的代謝組學方法,研究了溫莪術、蓬莪術及廣西莪術的代謝輪廓,采用NIST05、Kovats指數(shù)及部分對照品對揮發(fā)油組成進行定性鑒別并用歸一法半定量了溫莪術、蓬莪術及廣西莪術揮發(fā)油中各組分的含量,結合PCA和PLS-DA等模式識別方法建立三種不同植物來源的莪術質(zhì)量控制標準

4、,篩選了4個分類化學標志物莪術酮、吉馬酮、莪術二酮及表莪術酮并成功用于商品莪術藥材的來源和質(zhì)量控制。
　　 3)溫莪術、蓬莪術及廣西莪術不同溶劑提取物抗氧化研究。采用乙酸乙酯、95％乙醇及水等不同極性溶劑提取不同來源的干燥和新鮮莪術,然后進行提取物的DPPH、OH自由基清除能力、亞鐵螯合能力以及對Fe3+還原能力檢測,結果顯示95%乙醇和乙酸乙酯提取物具有較好的清除DPPH和OH自由基能力,其清除率與維C、BHA等陽性對照相當。

5、進一步基于提取物HPLC色譜指紋峰與其抗氧化活性關系,應用逐步回歸多元統(tǒng)計分析,篩選幾個潛在的抗氧化活性成分,其中姜黃素與相關文獻報道和實驗結果一致,表明多元統(tǒng)計分析可用于抗氧化活性組分的篩選。
　　 4)應用微量稀釋法進行溫莪術、蓬莪術及廣西莪術揮發(fā)油抗革蘭氏陽性菌(金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎腸球菌)和陰性菌(大腸埃希桿菌、銅綠假單胞菌)實驗,結果顯示溫莪術揮發(fā)油幾乎對所有測試的菌種都有一定的抑制能力,新鮮揮發(fā)油與干燥藥