基于代謝組學(xué)的莪術(shù)類藥材的質(zhì)量控制.pdf

1、中藥是中醫(yī)防病治病的主要形式和手段,是我國人們長期臨床用藥的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)。然而由于中藥來源廣泛、后繼處理儲(chǔ)存的形式多樣,使得中藥的質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)一直是中藥現(xiàn)代化研究的關(guān)鍵問題之一。本課題以我國較常用的中藥材莪術(shù)(包括溫莪術(shù)、蓬莪術(shù)及廣西莪術(shù))為研究對(duì)象,基于代謝組學(xué)方法研究不同植物來源的莪術(shù)的質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)方法,并考察了新鮮和干燥藥材的抗氧化和抗菌活性.主要內(nèi)容包括:
　　 1)應(yīng)用GC-MS和HPLC的代謝組學(xué)方法研究不同生長時(shí)期

2、溫莪術(shù)的代謝物輪廓,結(jié)合PCA等模式識(shí)別方法獲取溫莪術(shù)生長代謝輪廓特征,結(jié)果顯示溫莪術(shù)的不同生長時(shí)期代謝特征存在顯著差異,PCA分析顯示溫莪術(shù)生長可以大致分為4個(gè)時(shí)期,其整個(gè)生長時(shí)期的代謝輪廓特征形成一個(gè)近似閉合的代謝循環(huán)。此外,應(yīng)用HPLC檢測(cè)了溫莪術(shù)提取物中主要活性組分β-欖香烯、姜黃素、莪術(shù)醇、莪術(shù)二酮和吉馬酮在不同生長時(shí)期的含量積累,結(jié)果顯示這幾個(gè)活性組分在9月間含量較高,但此時(shí)藥材干燥后質(zhì)量較輕,若考慮不同時(shí)期藥材的干重,則以

3、每年12月至次年1月間較為合適,這與莪術(shù)生長代謝模式特征基本一致。因此本文建立的方法可用來確定溫莪術(shù)最佳采集時(shí)間和辨別商品藥材的采集時(shí)間。
　　 2)基于GC-MS的代謝組學(xué)方法,研究了溫莪術(shù)、蓬莪術(shù)及廣西莪術(shù)的代謝輪廓,采用NIST05、Kovats指數(shù)及部分對(duì)照品對(duì)揮發(fā)油組成進(jìn)行定性鑒別并用歸一法半定量了溫莪術(shù)、蓬莪術(shù)及廣西莪術(shù)揮發(fā)油中各組分的含量,結(jié)合PCA和PLS-DA等模式識(shí)別方法建立三種不同植物來源的莪術(shù)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

4、,篩選了4個(gè)分類化學(xué)標(biāo)志物莪術(shù)酮、吉馬酮、莪術(shù)二酮及表莪術(shù)酮并成功用于商品莪術(shù)藥材的來源和質(zhì)量控制。
　　 3)溫莪術(shù)、蓬莪術(shù)及廣西莪術(shù)不同溶劑提取物抗氧化研究。采用乙酸乙酯、95％乙醇及水等不同極性溶劑提取不同來源的干燥和新鮮莪術(shù),然后進(jìn)行提取物的DPPH、OH自由基清除能力、亞鐵螯合能力以及對(duì)Fe3+還原能力檢測(cè),結(jié)果顯示95%乙醇和乙酸乙酯提取物具有較好的清除DPPH和OH自由基能力,其清除率與維C、BHA等陽性對(duì)照相當(dāng)。

5、進(jìn)一步基于提取物HPLC色譜指紋峰與其抗氧化活性關(guān)系,應(yīng)用逐步回歸多元統(tǒng)計(jì)分析,篩選幾個(gè)潛在的抗氧化活性成分,其中姜黃素與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道和實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致,表明多元統(tǒng)計(jì)分析可用于抗氧化活性組分的篩選。
　　 4)應(yīng)用微量稀釋法進(jìn)行溫莪術(shù)、蓬莪術(shù)及廣西莪術(shù)揮發(fā)油抗革蘭氏陽性菌(金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎腸球菌)和陰性菌(大腸埃希桿菌、銅綠假單胞菌)實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示溫莪術(shù)揮發(fā)油幾乎對(duì)所有測(cè)試的菌種都有一定的抑制能力,新鮮揮發(fā)油與干燥藥