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文檔簡介
1、研究目的:了解新生大鼠缺氧缺血后腦組織中神經(jīng)干細(xì)胞巢蛋白(neuroepithelialstemcellproteinNestin)和血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactorVEGF)的表達(dá)。通過外源性堿性成纖維生長因子(basicfabroblastgrowthfactorbFGF)干預(yù)缺氧缺血腦損傷,了解bFGF對缺氧缺血新生大鼠腦組織nestin和VEGF表達(dá)的影響,探討bFGF對缺氧缺血新
2、生大鼠腦保護(hù)作用的神經(jīng)再生和血管形成機(jī)制。從而為進(jìn)一步了解新生大鼠缺氧缺血腦損傷(hypoxic-ischemicbraindamageHIBD)病理生理機(jī)制,探索治療HIBD的新策略及臨床應(yīng)用bFGF提供理論基礎(chǔ)。 方法:84只新生7日齡SD大鼠,分為三組,每組28只,(1)假手術(shù)組;(2)缺氧缺血組;腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.1ml,1次/日,注射7天;(3)bFGF干預(yù)組;缺氧缺血后bFGF4000u/Kgd腹腔內(nèi)注射,1次/
3、日,注射7天。制備大鼠HIBD模型后分別于即刻、3小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、3天、7天、14天將動(dòng)物處死,灌注腦組織脫水石蠟切片做免疫組化,采用SABC免疫組化方法檢測nestin、VEGF表達(dá)水平的變化。選取病變常見部位400倍光鏡下,計(jì)數(shù)5個(gè)視野下的陽性細(xì)胞數(shù)。采用單因素方差分析及q檢驗(yàn)。用SPSS11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)果:假手術(shù)組nestin在海馬、室管膜弱表達(dá),在皮質(zhì)幾乎不表達(dá)。假手術(shù)組VE
4、GF幾乎不表達(dá)。nestin和VEGF在大鼠缺氧缺血腦損傷后的表達(dá)增強(qiáng),且隨時(shí)間變化而有所變化。nestin7天達(dá)高峰,VEGF12小時(shí)達(dá)高峰。經(jīng)bFGF干預(yù)后nestin和VEGF表達(dá)較缺氧缺血組增高,nestin表達(dá)bFGF干預(yù)組與缺氧缺血組相比1天時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,持續(xù)至14天。VEGF表達(dá)與缺氧缺血組相比在缺氧缺血后3小時(shí)至3d均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論:新生大鼠缺氧缺血腦損傷后nestin和VEGF表達(dá)升高。
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