血管內皮生長因子基因治療新生鼠缺氧缺血性腦損傷的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該實驗根據(jù)VEGF的這些生物活性,將負載有鼠VEGF120cDNA的真核表達質粒pCDNA3.1注射至新生鼠缺氧缺血腦損傷局部,探討VEGF對新生鼠缺氧缺血性腦損傷(Hypoxic-ischemic brain damage HIBD)的治療作用.方法:一、構建真核表達載體PCDNA3.1/rVEGF120.二、通過結扎左頸總動脈,吸入8﹪氧氣制備左腦HEBD的新生鼠模型.三、將48只7日齡SD大鼠隨機分為兩組:(一)、對照組 制備HI

2、BD后,即刻通過前囟注射空載質粒100μg/只,回籠喂養(yǎng)7天;(二)、治療組,制備HIBD模型后,即刻通過前囟注射載有rVEGF120基因的質粒100μg/只,回籠喂養(yǎng)7天.在規(guī)定時間內,斷頭處死,即刻取出大腦,每組各取6全鈷、免疫組化 腦組織在經(jīng)4﹪甲醛固定后,常規(guī)石蠟包埋,應用LSAB法檢測VEGF蛋白的表達情況.四、蛋白點雜交 取新鮮腦組織,提取總蛋白,用點雜交儀加樣后,測定VEGF蛋白的表達情況.五、流式細胞儀 將腦組織制成單細

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