針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴對(duì)脊髓損傷大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的作用.pdf

1、背景：隨著現(xiàn)代化交通和工業(yè)的發(fā)展,脊髓損傷的發(fā)病率正在逐年增加。脊髓損傷常繼發(fā)于脊柱的暴力外傷,病人以脊髓受傷平面以下肢體的運(yùn)動(dòng)障礙為主要表現(xiàn),其病理生理機(jī)制以神經(jīng)細(xì)胞的凋亡最受關(guān)注。近幾年來,應(yīng)用神經(jīng)干細(xì)胞治療脊髓損傷的研究日益成為重點(diǎn)和熱點(diǎn)。已有實(shí)驗(yàn)研究表明,針刺治療能促進(jìn)脊髓損傷動(dòng)物內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化。臨床上也陸續(xù)有應(yīng)用針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴治療脊髓損傷成功的報(bào)導(dǎo)。因此我們?cè)O(shè)想針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴是通過原位誘導(dǎo)脊髓內(nèi)源性神

2、經(jīng)干細(xì)胞的增殖來修復(fù)脊髓損傷,從而改善或治愈截癱的。
　　目的：本實(shí)驗(yàn)利用改良Allen WD脊髓損傷動(dòng)物模型模擬臨床上針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴治療脊髓損傷的過程,觀察針刺治療過程中動(dòng)物模型雙后肢神經(jīng)功能恢復(fù)的情況、脊髓的病理變化以及脊髓內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖情況,研究針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴對(duì)脊髓損傷大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)、脊髓結(jié)構(gòu)改變和內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖的影響。進(jìn)一步分析內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與神經(jīng)功能恢復(fù)之間的聯(lián)系,以及針刺原位誘導(dǎo)脊髓

3、內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖的機(jī)制,為揭示針刺治療脊髓損傷的機(jī)理提供新的理論依據(jù)。
　　方法：取SPF級(jí)6周齡SD大鼠50只以改良Allen WD法制作第十胸椎水平急性重度脊髓背側(cè)挫傷模型。模型隨機(jī)分為:①針刺組24只,②對(duì)照組24只,③空白組2只。針刺組和對(duì)照組又隨機(jī)分為14、30、60和90d四個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只?？瞻捉M制作模型后4小時(shí)取材進(jìn)行HE染色,觀察切片組織損傷的程度。針刺組每天針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴一次,對(duì)照組不針刺;兩

4、組分別在術(shù)后1、14、30、60和90d用 Tarlov評(píng)分和IP評(píng)分評(píng)價(jià)雙后肢功能;兩組模型在取材前連續(xù)三天腹腔注射BrdU Bid標(biāo)記相應(yīng)時(shí)間增殖的內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞,按不同時(shí)間點(diǎn)分別于術(shù)后14、30、60和90d評(píng)分后取傷段脊髓進(jìn)行HE染色和抗BrdU免疫組化染色,觀察兩組動(dòng)物在不同時(shí)間點(diǎn)脊髓形態(tài)學(xué)特點(diǎn),觀察各切片BrdU陽性細(xì)胞數(shù)目及分布情況;進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析比較兩組之間不同時(shí)間點(diǎn)BrdU陽性細(xì)胞數(shù)目的差異。
　　結(jié)果：空白組H

5、E染色見脊髓內(nèi)部結(jié)構(gòu)輕度破壞,以脊髓背側(cè)為主,散在小出血灶和小片狀壞死灶,白質(zhì)神經(jīng)纖維水腫。功能評(píng)分顯示在各時(shí)間點(diǎn)針刺組雙下肢功能改善與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),功能改善與治療時(shí)間延長平行。對(duì)照組脊髓病理性重構(gòu)、神經(jīng)元凋亡日趨加重;針刺組脊髓結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)正常,正常神經(jīng)元的數(shù)目逐漸增多。免疫組化染色顯示不同時(shí)間點(diǎn)針刺組和對(duì)照組之間 BrdU陽性細(xì)胞數(shù)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：針刺督脈經(jīng)穴和夾