FOXL2基因在不同日齡蛋雞卵巢中的表達(dá)研究.pdf

1、FOXL2基因是在脊椎動(dòng)物中最先發(fā)現(xiàn)的與卵巢分化有關(guān)的的性別二態(tài)性標(biāo)記，同時(shí)也是人類常染色體基因中第一個(gè)被認(rèn)定在促進(jìn)人的眼瞼的早期發(fā)育、卵巢發(fā)育和維持卵巢功能方面具有重要作用的因子。隨著人們對(duì)于相關(guān)研究的不斷加深，發(fā)現(xiàn)在人的眼瞼、胚胎及成體卵巢顆粒細(xì)胞中FOXL2基因均呈現(xiàn)出特異性的表達(dá)，與人的卵巢早衰、卵巢腫瘤、不孕不育、性別決定以及小眼瞼裂綜合征等病癥有關(guān)。FOXL2基因在抑制卵泡凋亡和促進(jìn)卵巢儲(chǔ)備功能方面發(fā)揮著重要作用，其正常表達(dá)

2、對(duì)雞產(chǎn)蛋性能高低和卵巢發(fā)育程度很重要。但FOXL2基因在不同時(shí)期的產(chǎn)蛋雞體內(nèi)各組織器官中的表達(dá)情況以及與蛋雞卵巢發(fā)育不同時(shí)期的相關(guān)性仍未見報(bào)道。
　　本研究首先通過HE染色法觀察不同時(shí)期海蘭褐蛋雞卵巢的發(fā)育情況和組織學(xué)結(jié)構(gòu)，并通過進(jìn)行卵泡數(shù)量的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，研究蛋雞卵巢卵泡的具體發(fā)育狀況。根據(jù)GenBank上收錄的紅原雞的FOXL2基因序列(登錄號(hào)：JF_708868)，通過生物信息學(xué)分析其保守序列及酶切位點(diǎn)，利用 Primmer_

3、5.0設(shè)計(jì)并合成3對(duì)引物。通過瓊脂糖凝膠電泳試驗(yàn)，篩選出最優(yōu)引物。采集30日齡，60日齡，90日齡，120日齡、160日齡、220日齡、330日齡、480日齡共8個(gè)時(shí)期的蛋雞的下丘腦、眼瞼、肌肉、心臟、胸腺、肝臟、脾臟、腎臟組織樣品，進(jìn)行qR T-PCR試驗(yàn)。對(duì)比不同時(shí)期卵巢中FOXL2基因相對(duì)表達(dá)量的差異，分析FOXL2基因與雞卵巢發(fā)育及其與產(chǎn)蛋性能的相關(guān)性；對(duì)比FOXL2基因在不同時(shí)期和不同組織中相對(duì)表達(dá)量的變化，分析FOXL2基因

4、與蛋雞機(jī)體發(fā)育的相關(guān)性。HE染色和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明，220日齡卵巢的體積和重量最大，之后卵巢逐漸萎縮，重量減少；隨日齡增加，總卵泡數(shù)逐漸減少，初級(jí)卵泡數(shù)呈現(xiàn)先增加后減少趨勢(shì)，60日齡的初級(jí)卵泡數(shù)最高，然后逐漸減少；120日齡的次級(jí)卵泡數(shù)最高，并且明顯高于其他日齡產(chǎn)蛋雞；從30日齡開始，隨日齡增加，卵泡閉鎖率逐漸增多。qRT-PCR試驗(yàn)結(jié)果表明，120日齡雞卵巢中FOXL2基因的相對(duì)表達(dá)量高于其他日齡。FOXL2的表達(dá)與蛋雞卵巢發(fā)育存在