梁山縣人群血清中元素與生活習(xí)慣及幾種常見慢性病關(guān)系的研究.pdf

1、[目的]：
　　1.調(diào)查梁山縣人體血清硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛等元素的水平和分布特征。
　　2.分析該縣人群血清硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛等元素含量與高血壓病及血壓值、高血脂、肥胖等慢性疾病的關(guān)系以及與兒童生活習(xí)慣的相關(guān)性，探討血清十種元素含量與高血壓、高血脂、肥胖等常見慢性病以及兒童生活習(xí)慣的關(guān)系。
　　3.分析年齡、性別、個(gè)人行為習(xí)慣以及元素?cái)z入量等各種因素對(duì)人體血清中元素含量及慢性病的影

2、響。
　　4.揭示血清中硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛含量及其分布特點(diǎn)與高血壓、高血脂、肥胖等常見慢性疾病發(fā)病和兒童生活習(xí)慣的內(nèi)在關(guān)系。
　　5.為完善梁山縣人群元素研究與常見慢性病提供基礎(chǔ)資料，通過課題研究結(jié)果對(duì)人群進(jìn)行進(jìn)一步隨訪監(jiān)測(cè)及有效干預(yù)提供依據(jù)。
　　[方法]：
　　1.調(diào)查與取血
　　用整群抽樣法隨機(jī)從濟(jì)寧市梁山縣抽取六個(gè)自然村，以所有常住戶口居民作為調(diào)查對(duì)象，采用入戶問卷調(diào)查的方法對(duì)選

3、定調(diào)查對(duì)象進(jìn)行調(diào)查。在調(diào)查同時(shí)，對(duì)調(diào)查對(duì)象進(jìn)行健康查體，體檢內(nèi)容包括身高、體重、血壓等各項(xiàng)生理指標(biāo)。對(duì)受檢者進(jìn)行取血采樣，將被調(diào)查者的3mL抗凝血以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5-10分鐘，吸取血清置于Eppeddorf管中，密封編號(hào)后低溫運(yùn)輸保存。
　　2.血清元素測(cè)定
　　在確定的儀器條件和樣品處理方法下，對(duì)電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)測(cè)定血清微量元素進(jìn)行方法學(xué)檢驗(yàn)，分別計(jì)算出檢出限、精密度（日間精密度與日內(nèi)精密度）、

4、相對(duì)誤差、加標(biāo)回收率。用0.1％Trition-Ⅹ-100+0.5％NH4OH對(duì)血清稀釋10倍后直接用ICP-MS進(jìn)行分析，采用外標(biāo)法進(jìn)行儀器的工作曲線校準(zhǔn)，將樣品處理后，采用碰撞池電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法依次分批測(cè)定血清中十種元素含量，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)（10倍）即為血清中該元素濃度。
　　3.血脂測(cè)定
　　利用血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白-膽固醇試劑盒，根據(jù)規(guī)定的條件、步驟以比色法測(cè)定其含量，血清

5、低密度脂蛋白-膽固醇采用間接計(jì)算法定量。
　　4.質(zhì)量控制
　　從調(diào)查取樣到實(shí)驗(yàn)室各指標(biāo)測(cè)定，再到數(shù)據(jù)錄入整個(gè)流程均需做好質(zhì)量控制。調(diào)查前確定調(diào)查對(duì)象的選取原則，調(diào)查時(shí)做好問卷調(diào)查、體檢、樣品采集的質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室測(cè)定要將室內(nèi)變異控制在允許的范圍內(nèi)，測(cè)定血生化指標(biāo)時(shí)每測(cè)定30個(gè)樣品作一對(duì)質(zhì)控血清，所有的反應(yīng)試劑都小心的控制污染，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程均使用超純水稀釋，做好樣品收集過程的質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室測(cè)定過程中做質(zhì)量控制圖將室內(nèi)變異控

6、制在允許的范圍內(nèi)，測(cè)定血清微量元素時(shí)每測(cè)定20個(gè)樣品重新擬合一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。
　　5.數(shù)據(jù)處理
　　建立數(shù)據(jù)庫并錄入調(diào)查及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)研究所需數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理;統(tǒng)計(jì)分析均用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS20.0處理，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，所用的統(tǒng)計(jì)方法有兩樣本t檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)、方差分析、兩因素相關(guān)性檢驗(yàn)、非條件Logistic多元回歸分析;其中P＜0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　[結(jié)果]：
　　1.對(duì)碰撞池電

7、感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法測(cè)定血清中10種元素含量進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果顯示該方法能夠滿足血清中元素的分析要求。其中，B、Mn、Co、As、Ni、Se、Cd、Tl、Pb和Cr的檢出限分別為0.200μg/L、0.005μg/L、0.038μg/L、0.004μg/L、0.037μg/L、0.363μg/L、0.392μg/L、0.042μg/L、0.001μg/L、0.002μg/L，各元素的低、中、高加標(biāo)回收率為85％～115

8、％，各元素的低、中、高日內(nèi)精密度均優(yōu)于5％，各元素的低、中、高日間精密度均優(yōu)于15％，相對(duì)誤差平均值分別為0.92％、6.46％、8.65％、4.50％、6.36％、8.42％、2.56％、6.85％、9.03％、5.45％，各元素的相關(guān)系數(shù)r均優(yōu)于0.99。
　　2.梁山縣人群血清中硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛元素平均分布水平為:B52.72±30.16μg/L,Cr1.64±3.99μg/L,Mn3.57±4.23μ

9、g/L,Co0.02±2.61μg/L,Ni6.92±25.89μg/L,As1.74±1.63μg/L,Se113.74±29.36μg/L,Cd1.17±7.96μg/L，Tl0.01±1.27μg/L，Pb5.24±15.95μg/L。男性血清中B和Se的含量(60.18±46.40μg/L、117.73±25.92μg/L)明顯高于女性(49.97±28.33μg/L、108.54±26.51μg/L)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0

10、.01);血清中的Se經(jīng)方差分析，F(xiàn)=7.452，P＜0.001，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血清中硒含量隨著年齡的增大，有增高的趨勢(shì)，其中男性血清Se含量高于同齡別女性，，有明顯的年齡、性別差異(P＜0.05)。Co在正常人群女性血清中含量(0.23±2.30μg/L)明顯高于男性(0.13±0.98μg/L)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。血清中的Pb經(jīng)方差分析，F(xiàn)=2.459，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。30歲以下男性與女性血清

11、中的Pb含量比其他年齡組血清含量高，且30歲以下男性血清中Pb含量比女性含量高，有顯著的年齡、性別差異(P＜0.05);其他元素差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.經(jīng)完全隨機(jī)兩樣本之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，高血壓病人與正常對(duì)照人群之間的年齡、身高、體重、腰圍、TG、TC、LDL-c、HDL-c有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，高血壓病人組平均年齡、體重、腰圍顯著高于正常對(duì)照組，血清TG、TC、LDL-c也明顯高于正常對(duì)照人群，而HDL-c含量明顯低于正常健康人群血清

12、。用卡方檢驗(yàn)對(duì)兩組性別比例、飲酒率、吸煙率、喝茶率進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)高血壓組男性占43.60％，而正常組的男性占35.54％，高血壓患者的吸煙率、飲酒率、喝茶率均高于正常人群。對(duì)高血壓病人和正常人群的每日食鹽量和每日食油量進(jìn)行t檢驗(yàn)，高血壓病人組每日食鹽量和食油量均比正常對(duì)照組高。
　　高血壓病人與正常對(duì)照人群之間血清Se含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，高血壓病人Se含量高于正常對(duì)照人群，其他元素兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)血清元素含量與血壓值

13、進(jìn)行相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血清Cr、Se、Cd元素含量與收縮壓和舒張壓之間均存在弱相關(guān)，其中Cr和Cd收縮壓的相關(guān)系數(shù)r分別為-0.144和-0.136，舒張壓的相關(guān)系數(shù)r分別為0.072和0.065。Se的收縮壓和舒張壓的相關(guān)系數(shù)r分別為0.171和0.077。血清B元素含量與收縮壓之間存在弱相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r為0.045，血清Mn元素含量與舒張壓之間存在弱相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r為0.070。而血清Co、Ni、As、Tl、Pb元素含量與血壓值之間的相關(guān)

14、性沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)高血壓病與血清元素含量、吸煙、飲酒、遺傳因素等影響因素作Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清十種微量元素與是否患高血壓差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，BMI(OR=4.631,95％CI:3.682-5.823)、高齡（OR=3.059,95％CI:2.568-3.643）、遺傳因素（OR=1.099，95％CI:1.228-2.387）均為高血壓的危險(xiǎn)因素。
　　4.經(jīng)完全隨機(jī)兩樣本統(tǒng)計(jì)比較，血脂異常組血清Se(123.

15、89±29.91μg/L)水平高于正常對(duì)照人群(111.81±26.65μg/L)，血脂異常組血清Mn、Cr含量(3.32±3.56μg/L、1.41±0.57μg/L)均低于正常對(duì)照組(3.98±4.11μg/L、1.61±1.46μg/L)，其他元素水平兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　血清Cr含量與血脂中TC存在弱相關(guān)，血清Mn含量與血脂中TG、TC存在弱相關(guān)性，血清As含量與血脂中TC存在弱相關(guān)性，血清Se含量與血脂中TG、T

16、C、LDL-c、HDL-c均存在弱相關(guān)性，其他元素與血脂中TG、TC、LDL-c、HDL-c均無相關(guān)性。
　　對(duì)高血脂與血清元素含量及其它影響因素的Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn)，年齡、血清Cr、Mn、Se含量、飲酒、BMI與是否為高血脂病差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中高齡、高BMI、飲酒是高血脂的危險(xiǎn)因素，血清Cr、Mn、Se均為高血脂的保護(hù)因素。
　　5.經(jīng)完全隨機(jī)兩樣本統(tǒng)計(jì)比較，比較肥胖組和正常對(duì)照組血清中

17、十種元素的含量，肥胖組中Se和Tl元素含量均比對(duì)照組高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。男性血清中的As(1.93±1.30μg/L)、Se(127.21±29.06μg/L)高于女性(1.54±0.82μg/L;111.18±30.05μg/L)，其P＜0.05;女性血清中的Tl(0.22±1.43μg/L)高于男性（0.06±0.17μg/L），且P＜0.05;其他血清中元素B、Cr、Mn、Co、Ni、Cd、Pb男女之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

18、>　　對(duì)肥胖與血清元素含量及其它影響因素的Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn)，高齡、女性為肥胖的危險(xiǎn)因素，血清十種微量元素與是否患高血壓差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　6.男童血清中的硒和鉛元素濃度(100.75±23.37μg/L;7.06±12.78μg/L)高于女童（92.06±22.40μg/L;3.53±5.25μg/L），其P＜0.05，隨著每月水果食用次數(shù)的增加，血清中Tl元素濃度有下降趨勢(shì)，每天攝入蔬菜種類數(shù)3種以上兒童血清

19、中Mn元素濃度含量最高。不吃肉組兒童血清中Se元素含量最低，每月食用快餐次數(shù)少的兒童組血清中Pb含量最低。每月食用咸零食次數(shù)最多的血清中Mn含量增高，每月食用膨化食品次數(shù)最多組兒童血清中As含量明顯增高，每月食用補(bǔ)品次數(shù)多的兒童血清中Mn含量增多，每月食用補(bǔ)品次數(shù)0次組血清中Pb含量明顯低于每月食用補(bǔ)品次數(shù)5-10次、10-20次組，每月食用補(bǔ)品次數(shù)0次組血清中As含量明顯低于每月食用補(bǔ)品次數(shù)1-5次組。
　　血清中的Cr含量與每

20、月食用膨化食品和油炸食品呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.131，-0.211，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);血清中的Mn與每月食用咸的零食呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.236，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);血清中的As含量與每月食用膨化食品和咸的食品呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.186，0.122，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;血清中的Se與每月食用快餐呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.122，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);血清中的Pb含量與每月食

21、用快餐和膨化食品呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.199，0.160，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　[結(jié)論]：
　　1.通過對(duì)碰撞池ICP-MS法測(cè)定血清中10種元素含量進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，該方法的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍和最低檢測(cè)限都達(dá)到了臨床要求，結(jié)果顯示該方法能夠滿足測(cè)定需求。
　　2.梁山縣人群血清中硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛元素平均分布水平為:B52.72±30.16μg/L,Cr1.64±3.99

22、μg/L,Mn3.57±4.23μg/L,Co0.02±2.61μg/L,Ni6.92±25.89μg/L,As1.74±1.63μg/L,Se113.74±29.36μg/L,Cd1.17±7.96μg/L，Tl0.01±1.27μg/L，Pb5.24±15.95μg/L;男性血清中B和Se的含量明顯高于女性，血清中硒含量隨著年齡的增大，有增高的趨勢(shì)，其中男性血清Se含量高于同齡別女性，Co在正常人群女性血清中含量明顯高于男性。

23、>　　3.高血壓人群的年齡、體重、腰圍、TG、TC、LDL-c、吸煙率、飲酒率和喝茶率、每日食鹽量和每日食油量均高于一般人群;高血壓病人Se含量高于正常對(duì)照人群;高BMI、高齡、遺傳因素為高血壓的危險(xiǎn)因素。
　　4.血脂異常組人群血清Se水平高于正常組，血脂異常組血清Mn、Cr含量高于對(duì)照組，其中高齡、高BMI、飲酒是高血脂的危險(xiǎn)因素，血清Cr、Mn、Se均為高血脂的保護(hù)因素。
　　5.肥胖組和正常對(duì)照組血清中十種元素的含量