應(yīng)用組織芯片技術(shù)研究SRC-3基因在卵巢癌中的蛋白表達(dá)與擴(kuò)增及其臨床意義.pdf

1、背景與目的：卵巢癌占婦科惡性腫瘤的25﹪，在女性致死性癌癥中排第4位，死亡率居?jì)D科惡性腫瘤的首位。我國(guó)卵巢癌的發(fā)病率約為4.91/10萬(wàn)，且有逐年上升的趨勢(shì)。由于卵巢癌起病隱匿，早期無(wú)癥狀，大約3/4的病例在初診時(shí)已是浸潤(rùn)晚期的腫瘤，5年生存率低于20﹪，危害極大，故被喻為隱匿的殺手。因此，深入探討卵巢癌的病因及發(fā)病機(jī)制，對(duì)卵巢癌的預(yù)防與治療有著迫切與重要的學(xué)術(shù)和臨床價(jià)值。 卵巢癌的發(fā)病原因和機(jī)制目前尚未闡明，研究表明：卵巢癌的

2、發(fā)生涉及眾多染色體的異常，是一個(gè)多基因改變多步驟發(fā)展的復(fù)雜過(guò)程。癌基因激活、抑癌基因失活或凋亡相關(guān)基因失衡可導(dǎo)致細(xì)胞增殖及分化異常，造成細(xì)胞生長(zhǎng)性狀的轉(zhuǎn)變，誘發(fā)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者在研究卵巢癌染色體的區(qū)段擴(kuò)增和丟失譜中發(fā)現(xiàn)，人類20號(hào)染色體長(zhǎng)臂(20q)的擴(kuò)增是卵巢癌中相對(duì)高發(fā)的分子事件，提示染色體20q中可能存在某些與卵巢癌發(fā)生發(fā)展高度相關(guān)的癌基因。甾體類受體共激活因子-3基因(Steroid Re

3、ceptor Coaetivator-3，SRC-3)定位于人類染色體20q12區(qū)，是從乳腺癌細(xì)胞株中首先分離與克隆的新癌基因，該基因的異常已被證實(shí)與乳腺癌、肝癌、胃癌和前列腺癌等多種惡性腫瘤的細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)。然而，SRC-3基因在卵巢癌中的擴(kuò)增與表達(dá)及其臨床意義，國(guó)內(nèi)外至今少見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。 本研究以卵巢癌患者為研究對(duì)象，應(yīng)用組織芯片技術(shù)，結(jié)合熒光原位雜交和免疫組織化學(xué)的方法，研究SRC-3基因在卵巢癌組織中的擴(kuò)增與

4、表達(dá)情況，根據(jù)腫瘤的DNA倍性和臨床病理學(xué)資料，分析它們之間的相關(guān)性。 方法：選取1995-2005年間在中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院和附屬第一醫(yī)院婦科接受手術(shù)治療的卵巢癌患者150例，回顧患者臨床病理資料。使用兩點(diǎn)法制作含有150例卵巢癌的組織芯片，同時(shí)選取30例正常卵巢組織作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。運(yùn)用熒光原位雜交、免疫組化和流式細(xì)胞學(xué)方法，對(duì)150例卵巢癌組織中SRC-3基因的擴(kuò)增與表達(dá)和DNA倍性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)合腫瘤的臨床病理學(xué)資料，分析它

5、們之間的相關(guān)性。 結(jié)果：在150例卵巢癌組織芯片中，有128例腫瘤成功進(jìn)行了免疫組化檢測(cè)，其中46例(36﹪)出現(xiàn)SRC3蛋白的過(guò)度表達(dá)，而且與腫瘤的Silverberg氏分級(jí)和FIGO分期均有顯著的相關(guān)性(P<0.05)，其中45﹪的Silverberg氏G2/3級(jí)和46﹪的FIGO Ⅲ/Ⅳ期卵巢癌出現(xiàn)SRC-3蛋白的過(guò)度表達(dá)，其陽(yáng)性率明顯高于G1級(jí)(13﹪)和FIGO Ⅰ/Ⅱ期(15﹪)的腫瘤；在FISH檢測(cè)中，9﹪的卵巢癌

6、出現(xiàn)SRC3基因擴(kuò)增，且全部出現(xiàn)SRC-3蛋白的過(guò)度表達(dá)；而在SRC-3基因無(wú)擴(kuò)增的卵巢癌中，仍有29﹪的腫瘤檢測(cè)到SRC-3蛋白的過(guò)度表達(dá)。另外，絕大多數(shù)(89﹪)SRC-3蛋白過(guò)度表達(dá)的卵巢癌表現(xiàn)為非整倍體的DNA含量。 結(jié)論：SRC-3蛋白的過(guò)度表達(dá)可能通過(guò)影響腫瘤細(xì)胞染色體的不穩(wěn)定性，在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，可以作為預(yù)示該腫瘤惡性程度的分子標(biāo)記之一；在SRC-3的蛋白表達(dá)調(diào)控中，可能存在著SRC-3基因擴(kuò)增以