2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、組織芯片的概念是1998年由Kononen等首次提出,即將數(shù)十個、數(shù)百個乃至上千個小的組織片按預(yù)先設(shè)計的需要整齊地排放在某一載體上(通常是載玻片)而成的矩陣微縮組織切片。它可以克服傳統(tǒng)病理技術(shù)只能逐個組織切片進行研究的方式,從而成百、成千倍地提高效率,一次檢測即可獲取大量的生物學(xué)信息,且可以很好地代表其供體組織的組織特點,大大減少研究時間和經(jīng)費耗費。同時,組織芯片技術(shù)可以與DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗體等技術(shù)相結(jié)合,在基因、基因轉(zhuǎn)錄和相關(guān)

2、表達產(chǎn)物生物學(xué)功能三個水平上進行研究。這對人類基因組學(xué)的研究與發(fā)展,尤其對基因和蛋白質(zhì)與疾病關(guān)系的研究、疾病相關(guān)基因的驗證、疾病的分子診斷、治療過程的追蹤和預(yù)后等方面具有實際意義和廣闊的市場前景。 原發(fā)性肝癌是一種常見的惡性腫瘤,其死亡率占全球惡性腫瘤死亡率的第三位,為我國惡性腫瘤死亡率的第二位,而肝細胞肝癌(HCC,以下簡稱肝癌)占我國原發(fā)性肝癌中的80%以上。盡管肝癌的預(yù)防、早期診斷及治療等均取得了可喜的進步,但肝癌人群的總

3、體預(yù)后仍無顯著提高,5年生存率只有5%左右,肝內(nèi)播散轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)是阻礙病人術(shù)后長期生存的最嚴(yán)重問題。 肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是一個多步驟、多環(huán)節(jié)的過程。Folkman等1971年提出了腫瘤生長依賴新生血管的概念。而肝癌是富血管實體瘤,不管是肝內(nèi)復(fù)發(fā)還是肝外轉(zhuǎn)移,直接或間接參與血管生成的因素在肝癌的術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)中起非常重要的作用。當(dāng)前,腫瘤血管生成的評估包括腫瘤微血管密度(MVD)和血管生成因子檢測兩個方面。血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)

4、、血小板衍化內(nèi)皮細胞生長因子(PD-ECGF)等是重要的血管生成因子,與腫瘤的MVD和預(yù)后相關(guān)。 復(fù)發(fā)的預(yù)防措施主要是抑制、消滅殘癌,防止腫瘤再發(fā)。目前對于術(shù)后復(fù)發(fā)率高這樣一個現(xiàn)象的對策是:術(shù)后給予預(yù)防性化療栓塞或干擾素的大劑量治療等方法。但是目前更合理的方案是選擇性地對復(fù)發(fā)高?;颊邔嵤╊A(yù)防性治療,減輕患者的痛苦和經(jīng)濟負擔(dān)。因此臨床迫切需要能夠準(zhǔn)確預(yù)測病人預(yù)后的指標(biāo)。 本課題擬應(yīng)用組織芯片技術(shù)來制備肝癌組織芯片,并將其應(yīng)

5、用于研究MVD和血管生成因子VEGF和PD-ECGF在肝癌中的表達及其與預(yù)后的關(guān)系。 方法: 1.肝細胞癌組織芯片的制作 隨機選取1997年1月~2000年12月間在中山醫(yī)院肝癌研究所第一次行肝癌切除術(shù),并經(jīng)組織病理學(xué)檢查證實為肝細胞肝癌的400例病人的組織標(biāo)本石蠟塊,應(yīng)用組織芯片技術(shù)分別制作成5組各100例中密度肝癌組織芯片:A組一AFP(甲胎蛋白)陰性未復(fù)發(fā)組芯片;B組一AFP陰性復(fù)發(fā)組芯片;C組一AFP陽性

6、未復(fù)發(fā)組芯片;D組一AFP陽性復(fù)發(fā)組芯片以及E組一相應(yīng)的癌旁對照組芯片。芯片上各組織點直徑均為lmm,組織芯片位點排列整齊,較少移位和脫點。 2.血管生成因子在肝細胞癌中的表達及其與預(yù)后的關(guān)系 應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法研究肝癌組織芯片中MVD計數(shù)及VEGF和PD-ECGF的表達情況。單因素方差分析比較組間MVD差異,Log-rank法比較不同VEGF和PD-ECGF表達組間5年生存率(以下簡稱生存率)和5年無瘤生存率(以

7、下簡稱無瘤生存率)的差別??ǚ綑z驗(Fisher精確檢驗法)比較各組間5年累積復(fù)發(fā)率(以下簡稱復(fù)發(fā)率)和5年累積死亡率(以下簡稱死亡率)之間的差別;聯(lián)合檢測VEGF和PD-ECGF以評定其對預(yù)后的預(yù)測作用。COX比例風(fēng)險模型進行多因素分析以了解各個相關(guān)因素對生存率和無瘤生存率的影響。 結(jié)論: (1)組織芯片具有高通量、高效、快速的特點,其組織位點基本可以代表傳統(tǒng)病理切片上的組織病理特征,即從組織芯片得到的研究結(jié)果能夠代表

8、原組織的所有信息。 (2)腫瘤MVD計數(shù)與肝癌切除術(shù)后復(fù)發(fā)率呈正相關(guān)。 (3)腫瘤PD-ECGF表達陽性提示肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)率和死亡率增高,生存率和無瘤生存率均顯著降低。 (4)腫瘤VEGF表達陽性提示術(shù)后高復(fù)發(fā)可能,無瘤生存率顯著降低,但與生存率和死亡率無相關(guān)性。 (5)腫瘤VEGF和PD-ECGF同時表達陽性病例的復(fù)發(fā)率顯著高于非同時陽性病例,其無瘤生存率顯著降低,而在生存率和死亡率方面則無顯著差異。

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