擬南芥抗蔥鏈格孢侵染基因的差異表達(dá).pdf

1、本文在對擬南芥不同生態(tài)型接種不同植物病原菌后的抗病反應(yīng)基礎(chǔ)上對抗感表現(xiàn)不同的生態(tài)型的抗性機制及抗性相關(guān)基因的差異表達(dá)進(jìn)行了研究，結(jié)果如下： 測定擬南芥11個生態(tài)型接種8種不同植物病原菌后發(fā)現(xiàn)，供試擬南芥對田璇花白粉病菌、白菜黑斑病菌、玉米大斑病菌和棉花黃萎病菌均表現(xiàn)為非親和反應(yīng)。轉(zhuǎn)基因NahG和生態(tài)型Col、Shakh-dara以及生態(tài)型Nd-1、WS-2、Kas-1分別對絲瓜白粉病菌、蔥鏈格孢、葫蘆白粉病菌和番茄早疫病菌表現(xiàn)為

2、親和反應(yīng)；生態(tài)型Ler對蔥鏈格孢和番茄早疫病菌表現(xiàn)親和反應(yīng)；而生態(tài)型C24、Est-1、Ws-0和Bay-0對絲瓜白粉病菌、蔥鏈格孢、葫蘆白粉病菌和番茄早疫病菌均表現(xiàn)為非親和反應(yīng)。 轉(zhuǎn)基因擬南芥NahG和生態(tài)型WS-2、Shakh-dara接種蔥鏈格孢后，細(xì)胞防御酶系活性和非酶類物質(zhì)丙二醛含量有規(guī)律性的變化，其中SOD、CAT、PPO和MDA含量變化與擬南芥抗蔥鏈格孢侵染密切相關(guān)；POD和PAL活性變化與擬南芥抗蔥鏈格孢侵染的關(guān)

3、系尚不明確。 利用改良的DDRT-PCR差異顯示技術(shù)，從接種蔥鏈格孢的擬南芥cDNA中分離得到了135條差異表達(dá)片段。反式Northern雜交表明，38個差異表達(dá)片段的二次擴增產(chǎn)物與對照或接種處理的cDNA雜交有陽性反應(yīng)，陽性率為28.1﹪。將獲得的陽性差異表達(dá)片段與特異于病程相關(guān)蛋白基因PR-1、PR-2、PR-3、PR-4、PDF1.2的探針進(jìn)行反式Northern雜交檢測，均沒有產(chǎn)生陽性信號。對其中的8條差異表達(dá)片段進(jìn)行克

4、隆、測序、同源性分析后發(fā)現(xiàn)，抗感擬南芥生態(tài)型受蔥鏈格孢侵染后不僅誘導(dǎo)了呼吸過程中有關(guān)基因的表達(dá)如nad4L，同時還誘導(dǎo)了一些與細(xì)胞壁構(gòu)建相關(guān)基因(如Sla1)、蛋白質(zhì)或縮氨酸水解等有關(guān)基因的表達(dá)。 通過RACE技術(shù)獲得了片段47的5’端序列。同源性分析表明，該序列與煙曲霉、粗糙脈孢菌和釀酒酵母菌、酵母的細(xì)胞骨架組裝控制蛋白Sla1的同源性分別為77﹪和36﹪；與紅松ORF64c、人類含有SH3域的蛋白SH3P17和海膽src家族