多功能PAMAM樹狀大分子雙載藥體系-合成、表征及腫瘤聯(lián)合治療應(yīng)用研究.pdf

1、隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展及大量新型納米材料的出現(xiàn)，一些功能化納米材料已經(jīng)被用作藥物傳輸載體并顯示出極大的優(yōu)勢(shì)。在眾多的抗癌藥物載體體系中，以樹狀大分子作為平臺(tái)的載藥體系正成為目前的研究熱點(diǎn)。本課題以第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(generation5Polyamidoaminedendrimer,G5PAMAMdendrimer)為藥物載體，分別構(gòu)建了用于癌癥治療的單藥以及雙藥藥物輸送體系。我們將不同官能團(tuán)共價(jià)連接到樹狀大分子表面以改善其生

2、物相容性，并賦予其細(xì)胞內(nèi)定位和靶向輸送藥物的功能;將不同抗腫瘤藥物通過物理包裹或者化學(xué)鍵合的方式負(fù)載到功能化修飾的樹狀大分子上;并且詳細(xì)研究了功能化樹狀大分子載體和樹狀大分子載藥復(fù)合物的性質(zhì)及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。
　　本研究首先將抗腫瘤藥物α-Tos共價(jià)連接到樹狀大分子表面，通過局部乙?；磻?yīng)中和了G5PAMAM樹狀大分子表面的部分剩余氨基基團(tuán)，并且將熒光標(biāo)記物異硫氰酸熒光素(FI)和靶向試劑葉酸(FA)分別修飾到氨基基團(tuán)上，得到了G5

3、.NHAcn-α-Tos-FI-FA載藥復(fù)合物，將其用于藥物的癌癥靶向治療研究。1HNMR和紫外等表征結(jié)果表明，成功制備出G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA載藥復(fù)合物。MTT分析、細(xì)胞形態(tài)觀察、共聚焦顯微鏡觀察和流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)結(jié)果顯示，dendrimer-α-Tos的抗腫瘤作用不但僅與α-Tos藥物本身相關(guān)，而且葉酸修飾的G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA可特異性靶向葉酸受體過表達(dá)的KB細(xì)胞，從而表現(xiàn)出靶向抗腫瘤活性。<

4、br>　　之后，本研究分別通過化學(xué)鍵合α-Tos以及物理包裹抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)，經(jīng)過部分乙酰化修飾后，再連接熒光標(biāo)記物FI和靶向試劑FA，從而制得樹狀大分子雙載藥體系G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA/DOX。1HNMR和紫外表征結(jié)果顯示，每個(gè)樹狀大分子負(fù)載了5個(gè)α-Tos藥物分子和4.1個(gè)DOX藥物分子。MTT分析和細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果表明在給藥濃度下載藥復(fù)合物的生物活性僅與藥物有關(guān)，其中G5.NHAcn-α-Tos-FI-

5、FA/DOX對(duì)細(xì)胞的殺傷作用明顯優(yōu)于單藥復(fù)合物G5.NHAcn-FI-FA/DOX，表明了雙載藥體系G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA/DOX的增強(qiáng)的藥物作用效果;體外釋放動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果表明該載藥復(fù)合物可緩慢持續(xù)釋放藥物DOX;共聚焦顯微鏡觀察和流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)以及靶向MTT測(cè)試結(jié)果表明了雙載藥體系G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA/DOX可對(duì)葉酸受體過表達(dá)的KB細(xì)胞靶向選擇并表現(xiàn)出特異性的治療效果。本章結(jié)果表明構(gòu)建雙載藥