多環(huán)芳烴暴露對新生兒調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：探討多環(huán)芳烴暴露對新生兒調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的影響。
　　方法：
　　第一部分：(1)收集200例新生兒臍帶血，高分辨溶解曲線分析熒光定量法檢測Treg細(xì)胞，（2）ELISA法檢測臍帶血PAH-DNA加合物及IL-4濃度，（3）問卷調(diào)查隨訪生后1-1.5年，詢問嬰幼兒是否反復(fù)喘息和頑固性濕疹，并詢問父母是否患哮喘等過敏性疾病。
　　第二部分：收集7例新生兒臍帶血,分離 CD4+CD25+T細(xì)胞體外CD3CD28及IL-2

2、誘導(dǎo)培養(yǎng)3天，設(shè)加PAHs組及對照組。流式細(xì)胞術(shù)檢測Foxp3、STAT3、STAT5的表達及 Treg細(xì)胞抑制功能，結(jié)合重亞硫酸鹽的焦磷酸測序法檢測Foxp3基因啟動子區(qū)和TSDR區(qū)甲基化水平，RT-PCR檢測 DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、IL-4 mRNA表達水平，ELISA檢測培養(yǎng)后上清液IL-4蛋白水平。
　　結(jié)果：
　　第一部分：(1)喘息組和濕疹組Treg數(shù)量明顯低于非癥狀組。特應(yīng)性組Treg數(shù)量顯著

3、低于非特應(yīng)性組Treg數(shù)量；特應(yīng)性組中發(fā)生喘息和濕疹組Treg數(shù)量顯著低于非特應(yīng)性組，但非特異性組仍低于無癥狀組。（2）喘息組和濕疹組 PAH-DNA加合物濃度顯著高于非癥狀組；特應(yīng)性組中發(fā)生喘息和濕疹嬰幼兒PAH-DNA加合物濃度低于非特應(yīng)性組。（3）喘息組和濕疹組臍帶血IL-4濃度明顯高于無癥狀組。
　　第二部分：1）PAHs抑制Foxp3表達及Treg細(xì)胞抑制功能；2）PAHs抑制STAT5表達，p<0.05,上調(diào)STAT3

4、表達，p<0.05；3）PAHs增加Foxp3基因啟動子區(qū)和TSDR區(qū)甲基化；4）PAHs上調(diào)DNMT1、DNMT3a、DNMT3b p<0.05；5）PAHs誘導(dǎo)CD4+CD25+T細(xì)胞產(chǎn)生IL-4，IL-4與STAT5表達呈負(fù)相關(guān)，與STAT3表達呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　?。?）宮內(nèi)遺傳因素和PAH-DNA加合物可影響Treg分化，Treg細(xì)胞分化相對不足可能是生后嬰幼兒對過敏性疾病形成的原因之一。
　　（2）P