雌雄激素對雄性大鼠和男性血脂代謝影響的實驗與臨床研究.pdf

1、背景：心腦血管病是嚴重危害人類健康的疾病，在我國，心腦血管病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。近年來，隨著對動脈粥樣硬化發(fā)病機制研究的進展，越來越多的證據(jù)表明血脂代謝紊亂在動脈硬化的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后過程中起著很重要的作用，使得血脂代謝紊亂與動脈硬化的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后關(guān)系的研究成為動脈硬化研究領(lǐng)域的一個熱點。改善血脂代謝異常的措施成為預(yù)防動脈硬化和心腦血管病發(fā)生發(fā)展的重要手段之一。高脂血癥的發(fā)病率在性別、年齡方面存在差異，流行病學(xué)顯示男性隨著年齡的

2、增長高脂血癥、冠心病的發(fā)病率明顯高于女性,年齡增長的同時，男性性激素水平下降，尤其是雄性激素下降，因而使性激素的變化與高脂血癥的關(guān)系成為當前心腦血管病預(yù)防機制研究的熱點之一。以往人們對雌激素與絕經(jīng)期女性血脂代謝的關(guān)系研究較多，近年來研究發(fā)現(xiàn)，男性體內(nèi)的雌、雄激素與血脂代謝之間也存在著密切內(nèi)在聯(lián)系，但結(jié)果尚有爭議，促使我們開展此方向的研究。 目的： 1、通過高脂飲食，建立去勢大鼠高脂血癥動物模型； 2、探討外源性二

3、氫睪酮和雌二醇對雄性去勢大鼠血脂代謝的影響及可能機制； 3、研究內(nèi)源性雌、雄激素作用被阻斷或者部分阻斷后對雄性大鼠血脂代謝的影響； 4、進行初步臨床資料分析，探討中老年男性雌、雄激素和血脂關(guān)系。 材料與方法： 1、12只9w齡SD雄性大鼠，去勢后，隨機分為高脂飲食組和標準飼料組，10周后處死全部動物，測定血漿各種血脂指標，肝臟組織進行HE 染色，觀察肝臟組織的病理變化。血脂結(jié)果采用t-Student 檢驗

4、進行分析。 2、24只雄性SD 大鼠，行去勢手術(shù)后，隨機分為對照組、雌二醇組、二氫睪酮低劑量組和高劑量組；雌二醇組皮下注射玉米油雌二醇溶液（0.2mg·kg-1· d-1）；對照組注射醫(yī)用玉米油，二氫睪酮低劑量組和二氫睪酮高劑量組皮下注射不同劑量玉米油二氫睪酮溶液（分別為0.6 和6.0mg·kg-1· d-1）。各組飼喂高脂飲食。干預(yù)處理14w后，處死實驗動物，血樣離心后測定血脂、睪酮、雌二醇和二氫睪酮等指標；稱量各組動物的體

5、重，取肝臟組織處理，對照組、雌二醇組、二氫睪酮低劑量組以RT-PCR 方法測定肝酯酶和膽固醇7α羥化酶的mRNA 表達；對照組、二氫睪酮低劑量組和高劑量組，進行HE和蘇丹Ⅲ染色，觀察肝細胞的脂肪沉積情況；數(shù)據(jù)采用單因素方差分析和LSD-t 檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。 3、18只雄性SD 大鼠，隨機分為對照組、雄激素拮抗組和雌激素拮抗組，每組6 只，各組飼喂高脂飲食，對各實驗組進行以下處理：對照組生理鹽水灌胃, 雄激素拮抗組用氟他胺溶液

6、灌胃（1 mg·kg-1· d-1）；雌激素拮抗組用他莫西芬溶液灌胃（2 mg·kg-1·d-1，）。干預(yù)處理14 w，處死全部實驗動物，心臟取血離心后，酶法測定血漿血脂濃度, 放免法檢測血清睪酮、雌二醇水平等指標；數(shù)據(jù)采用單因素方差分析進行統(tǒng)計學(xué)處理。 4、根據(jù)頸動脈彩超檢測結(jié)果，將60 例中老年男性分為：動脈硬化組32例，對照組28 例。檢測所有入選病例的血壓、體重指數(shù)；清晨采集血樣標本，離心后用放免法測定血清睪酮、雌二醇濃

7、度，酶法測定血脂濃度。比較兩組之間血清性激素水平、血脂的差異；分析兩組血脂與雌、雄激素的相關(guān)性；數(shù)值變量兩組間比較采用t-Student 檢驗，血脂濃度與雌、雄激素水平之間的關(guān)系采用Pearson 相關(guān)分析。 結(jié)果： 1、高脂飲食對去勢雄性大鼠脂代謝的影響高脂飲食組血漿TC、TG、LDL-C 水平高于標準飲食組（P＜0.05），HDL-C 兩組間無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；肝臟組織病理顯示，高脂飲食組肝臟脂肪變性，肝臟

8、細胞體積較正常肝細胞明顯增大，胞漿內(nèi)有部分脂肪空泡，而標準飲食組肝臟結(jié)構(gòu)正常，肝血竇清晰可見，肝細胞大小正常。 2、雌二醇、二氫睪酮對去勢雄性大鼠脂代謝影響雌二醇組血漿TC、LDL-C、HDL-C 和TG 水平高于對照組（P＜0.05）；二氫睪酮低劑量組和高劑量組：血漿TC、HDL-C 和LDL-C 水平低于對照組，血漿TG 水平高于對照組（P＜0.05）；隨著血清二氫睪酮濃度升高，TC 下降幅度增大；二氫睪酮干預(yù)兩組血漿TG

9、水平高于對照組，并且TG 濃度隨著二氫睪酮劑量的增大而升高；肝臟組織中的肝酯酶和膽固醇7α羥化酶的mRNA 表達：二氫睪酮低劑量組表達高于對照組（P＜0.05），雌二醇組的表達低于對照組（P＜0.05）；肝臟組織病理顯示，對照組肝臟重度脂肪沉積，并以大泡性脂滴為主；二氫睪酮低劑量組僅見輕微脂肪沉積；二氫睪酮高劑量組的肝臟組織病理接近正常。 3、雌、雄性激素拮抗劑對SD 雄性大鼠脂代謝的影響雌激素拮抗組：血漿TC 和LDL-C 水

10、平低于正常對照組（P＜0.05），血漿HDL-C 水平高于正常對照組（P＜0.05）；雄激素拮抗組：血漿TC 水平高于正常對照組（P＜0.05）；血漿HDL-C、LDL-C 水平與正常對照組之間無統(tǒng)計學(xué)差異；各組間血漿TG 水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。 4、中老年動脈硬化男性血脂與性激素改變關(guān)系動脈硬化組血清睪酮水平顯著低于對照組(P＜0.05)；動脈硬化組血漿TC、TG、LDL-C水平高于對照組；相關(guān)分析顯示：動脈硬化組

11、男性血漿睪酮水平與TC和LDL-C水平呈負相關(guān)(P＜0.05)，血清雌二醇水平與TC、LDL-C濃度顯著正相關(guān)(P＜0.05)；正常對照組男性血清睪酮水平和LDL-C濃度呈負相關(guān)(P＜0.01)，血清雌二醇水平與LDL-C濃度顯著正相關(guān)(P＜0.05)。 結(jié)論： 1、在去勢雄性大鼠給予高脂飼料可以造成高脂血癥動物模型，為進一步研究性激素與血脂代謝的關(guān)系提供可靠的動物模型； 2、外源性二氫睪酮降低雄性大鼠血漿TC、

12、HDL-C、LDL-C 水平和升高血漿TG，對血漿TC 和TG 的影響具有劑量依賴性；其可能機制是：通過影響上調(diào)肝酯酶和膽固醇7α羥化酶的表達降低血漿TC、HDL-C、LDL-C 水平，通過加強肝臟脂肪的分解代謝導(dǎo)致血漿TG 的升高； 3、雌二醇升高血漿TC、HDL-C、LDL-C 水平，通過下調(diào)肝酯酶和膽固醇7α羥化酶的表達是其影響血脂可能機制之一； 4、在雄性大鼠，內(nèi)源性雄激素阻斷后，血漿TC 升高，說明內(nèi)源性雄激素