甲狀腺功能及雄激素對(duì)脂代謝的影響.pdf

1、目的:
　　第一部分 甲狀腺功能與脂代謝
　　多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)甲狀腺功能減退癥、亞臨床甲狀腺功能減退癥甚至正常范圍高促甲狀腺激素(TSH)水平均可引起血脂異常;TSH是診斷甲狀腺疾病最敏感的指標(biāo)，但易受研究地區(qū)、年齡差異、性別分布等因素影響，因此其參考值上限的界定目前仍存在爭(zhēng)議;甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPOAb)作為自身免疫性甲狀腺疾病的重要標(biāo)志，在亞臨床甲減的轉(zhuǎn)歸中起重要作用，其是否與脂代謝異常相關(guān)，目前研究較少。本研究通過(guò)橫

2、斷面調(diào)查建立了中國(guó)東部地區(qū)不同性別不同年齡段TSH的參考值范圍，并以此為標(biāo)準(zhǔn)研究人群中甲狀腺疾病的患病率，探討TPOAb及TSH水平與脂代謝等動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病(ASCVD)危險(xiǎn)因素的關(guān)系。
　　第二部分 雄激素與脂代謝
　　已有研究表明，隨增齡而降低的睪酮水平參與脂代謝異常的發(fā)生發(fā)展。本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn)，中老年男性低睪酮水平與總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的升高及高密度脂蛋白膽固醇(HDL

3、-C)的下降相關(guān);同時(shí)給睪酮水平較低的中老年男性補(bǔ)充生理劑量睪酮后，可觀察到其改善脂代謝異常，并改善頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度，帶來(lái)心血管獲益。然而睪酮水平變化對(duì)膽固醇代謝調(diào)節(jié)作用的相關(guān)分子機(jī)制尚不清楚。本研究通過(guò)建立中老年雄性高脂大鼠模型，去勢(shì)后再補(bǔ)充睪酮，建立不同濃度睪酮的動(dòng)物模型，模擬中老年男性不同程度睪酮部分缺乏的狀態(tài)，觀察睪酮濃度變化對(duì)脂代謝等ASCVD危險(xiǎn)因素的影響及可能的分子機(jī)制。
　　材料與方法:
　　一、
　

4、　1、采用橫斷面研究方法，納入2009年1月至2010年1月于江蘇省徐州市中心醫(yī)院和山東省臨沂市人民醫(yī)院健康體檢的1806名成年體檢者（男性396名、女性1410名，年齡35～87歲），檢測(cè)身高、體重、血壓、TSH、TPOAb、空腹血糖(FPG)、TC、甘油三酯(TG)及HDL-C水平。調(diào)查總?cè)巳杭安煌詣e不同年齡段人群的TSH參考值范圍、甲狀腺疾病患病率情況，并探討TPOAb及TSH水平與血脂等ASCVD危險(xiǎn)因素的相關(guān)性。
　　

5、2、進(jìn)一步行亞組分析，研究TPOAb陽(yáng)性人群與膽固醇的關(guān)系:采用TSH參考值范圍0.3-4.8mIU/L，篩選出甲狀腺功能正常者1607名（年齡35～65歲，男女性別比例為1∶3.7），根據(jù)TPOAb水平分為TPOAb陽(yáng)性組(TPOAb≥5.61 IU/ml，n=205)和TPOAb陰性組(TPOAb＜5.61 IU/ml，n=1402)。再依據(jù)血清TSH水平進(jìn)一步分層:低TSH水平(0.3-0.99 mIU/L)、中TSH水平(1.0

6、-1.89 mIU/L)及高TSH水平(1.9-4.80 mIU/L)，每層再分為TPOAb陽(yáng)性組和TPOAb陰性組，分析甲狀腺功能正常人群TPOAb及TSH水平對(duì)血脂譜的影響。
　　二、
　　1、50只10月齡SD雄性大鼠（相當(dāng)于男性中年以后），高脂飲食6周，47只存活并成功建立高脂動(dòng)物模型。
　　2、隨機(jī)對(duì)其中的41只大鼠行去勢(shì)手術(shù)，6只行假去勢(shì)手術(shù)，作為對(duì)照組。適應(yīng)性喂養(yǎng)12天后，去勢(shì)大鼠中24只存活，隨機(jī)分為4

7、組:睪酮完全缺乏組(n=6，注射相應(yīng)量的醫(yī)用玉米油)、睪酮低劑量組（n=5，每三天皮下注射1mg/kg丙酸睪酮）、睪酮中劑量組（n=6，每三天皮下注射5mg/kg丙酸睪酮）和睪酮高劑量組（n=7，每三天皮下注射25mg/kg丙酸睪酮），對(duì)照組注射相應(yīng)量的醫(yī)用玉米油，各組均處理8周。
　　3、抽取外周血檢測(cè)睪酮、血脂、血糖、胰島素水平，觀察不同睪酮濃度對(duì)血脂等指標(biāo)的影響。
　　4、處死全部大鼠，取部分肝臟組織行HE、油紅及Ma

8、sson染色，觀察肝臟組織脂質(zhì)浸潤(rùn)及纖維化情況。
　　5、取主動(dòng)脈、頸動(dòng)脈，行HE及Masson染色，觀察大動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu)和形態(tài)變化。
　　6、取肝臟組織，RT-PCR對(duì)參與膽固醇代謝的關(guān)鍵基因(SIRTl、CETP、LCAT、LDLR、SOCS3、VCAM-1、HMGCR、ABCA1、CYP7A1、SR-BI及UGT1A1)進(jìn)行篩查，找出其中既受睪酮調(diào)控又影響膽固醇代謝的目標(biāo)基因。
　　7、采用Western Blot

9、方法，觀察睪酮濃度變化對(duì)目標(biāo)基因蛋白表達(dá)水平的影響，以及膽固醇代謝過(guò)程中某些關(guān)鍵酶的磷酸化變化。
　　結(jié)果:
　　1、臨床研究:
　　①總?cè)巳褐?，TSH參考值范圍為0.35-5.48 mIU/l;＜40歲人群，TSH參考值范圍為0.40-5.04 mIU/L，40歲及以上人群則為0.33-5.70 mIU/L。TSH參考值上限隨著年齡的增加而增加，其上限值在相同年齡組中，女性均高于男性。
　?、趤喤R床甲減（TSH

10、水平升高）的患病率為1.88％，自身免疫性亞臨床甲減（TPOAb陽(yáng)性伴TSH升高）的患病率為1.22％，TPOAb陽(yáng)性率為13.95％，單純TPOAb陽(yáng)性（TSH水平正常）率為12.13％。TPOAb陽(yáng)性率及單純TPOAb陽(yáng)性率在女性中隨年齡的增加而增加，且女性高于男性，≥40歲時(shí)尤為明顯。
　　③甲狀腺疾病狀態(tài)與血脂等代謝因素的關(guān)系:總?cè)巳褐袉渭僒POAb陽(yáng)性組TC高于對(duì)照組(P＜0.05)，TG、HDL-C、LDL-C無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

11、差異（均P＞0.05）。亞臨床甲減組、自身免疫性亞臨床甲減組、TPOAb陽(yáng)性組的TC、TG、HDL-C、LDL-C均與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）。
　?、軄喗M分析發(fā)現(xiàn)，甲狀腺功能正常人群中TPOAb陽(yáng)性患者較TPOAb陰性者，TC及HDL-C亦升高（均P＜0.05），LDL-C有升高趨勢(shì)(P=0.053)。將TSH參考值范圍分層后發(fā)現(xiàn)，低TSH水平時(shí)，TPOAb陽(yáng)性患者較TPOAb陰性者，TC無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)

12、;中TSH水平時(shí)，TPOAb陽(yáng)性患者較TPOAb陰性者，TC有升高趨勢(shì)(P=0.121)，HDL-C升高(P＜0.05);高TSH水平時(shí)，TPOAb陽(yáng)性患者較TPOAb陰性者，TC升高(P＜0.05)。
　　2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn):
　?、俑咧Ｐ统晒?高脂飲食6周，與高脂飲食前比較，TC、TG及LDL-C均升高（均P＜0.01），HDL-C下降(P＜0.01)。
　　②去勢(shì)后補(bǔ)充不同濃度睪酮，各組大鼠睪酮水平的變化:睪酮中

13、劑量組與對(duì)照組睪酮水平相近(P＞0.05)，高劑量組睪酮高于對(duì)照組(P＜0.05)，完全缺乏組、低劑量組睪酮均低于對(duì)照組（均P＜0.05）。
　?、廴?shì)后補(bǔ)充不同濃度睪酮，各組大鼠血脂等指標(biāo)的變化:與對(duì)照組比較，睪酮高、中劑量組TC、TG、HDL-C及LDL-C均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05），低劑量組、完全缺乏組TC及LDL-C水平均升高（均P＜0.05），TG、HDL-C均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）;組間比較，高、中劑量組

14、TC及LDL-C均低于完全缺乏組（均P＜0.05），各組TG及HDL-C水平無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）;各組血糖及胰島素水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）。
　　④肝臟組織學(xué)變化（JEDA801D形態(tài)學(xué)圖像分析）:各組肝細(xì)胞脂肪變性情況（HE和油紅染色顯示）:睪酮高劑量組、對(duì)照組、中劑量組、低劑量組、完全缺乏組依次為輕度、輕中度、中度、中重度、重度脂肪變性。各組肝細(xì)胞纖維化情況（Masson染色顯示）:完全缺乏組、低劑量組

15、和中劑量組可見(jiàn)纖維化，余兩組未見(jiàn)明顯纖維化。
　?、荽髣?dòng)脈血管形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化（JEDA801D形態(tài)學(xué)圖像分析）:HE和Masson染色顯示:各組大動(dòng)脈管壁平滑肌纖維成分均有所減少，膠原纖維均有所增厚，但組間未見(jiàn)明顯差異。
　?、轗T-PCR及Western Blot實(shí)驗(yàn)尚在進(jìn)行階段。
　　結(jié)論:
　　1、東部地區(qū)人群TSH參考值范圍為0.35-5.48 mIU/l，亞甲減患病率為1.88％，自身免疫性亞臨床甲減患

16、病率為1.22％，TPOAb陽(yáng)性率為13.95％，單純TPOAb陽(yáng)性（TSH水平正常）率為12.13％。在女性中，TPOAb陽(yáng)性率及單純TPOAb陽(yáng)性率隨年齡的增加而增加，且高于男性，≥40歲時(shí)尤為明顯。
　　2、TPOAb系自身免疫性甲狀腺疾病重要標(biāo)志，和TC代謝有關(guān);TPOAb陽(yáng)性，當(dāng)TSH在正常范圍高值時(shí)，TC水平已經(jīng)開(kāi)始升高。建議臨床醫(yī)生關(guān)注TPOAb陽(yáng)性患者，適時(shí)給予生活方式干預(yù)及調(diào)脂治療，預(yù)防ASCVD的發(fā)生發(fā)展。