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1、在以往的OPN表達(dá)的研究中,大部分的工作采用了免疫組織化學(xué)、RT-PCR和Northern Blot方法,只能半定量分析,不能在mRNA水平準(zhǔn)確檢測表達(dá).應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)可以對OPN的mRNA水平進(jìn)行實(shí)時(shí)定量分析,該文同時(shí)利用臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本和大鼠肝癌模型進(jìn)行骨橋蛋白基因水平表達(dá)的檢測,并以此探討骨橋蛋白在肝癌發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的表達(dá)變化及其作為早期診斷和潛在的治療靶點(diǎn)的意義.第一部分OPN在人原發(fā)性肝細(xì)胞癌中表達(dá)的研究.利用肝癌手
2、術(shù)標(biāo)本采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-TimeQuantitative RT-PCR)檢測了OPN編碼基因的表達(dá)水平.結(jié)果提示,OPN是一個(gè)重要的肝癌相關(guān)基因,在肝細(xì)胞癌中表達(dá)明顯增強(qiáng),并且同腫瘤大小相關(guān).OPN在肝硬化中的表達(dá)相對于正?;蛘吒窝赘谓M織而言沒有明顯的變化.OPN在肝癌的發(fā)生和發(fā)展中可能起重要作用,并且具有用作肝癌診斷和預(yù)后判斷的潛在價(jià)值.我們同時(shí)發(fā)現(xiàn),OPN的表達(dá)同一些肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)指標(biāo)之間沒有明顯的相關(guān)性
3、,提示OPN表達(dá)水平同腫瘤灶的轉(zhuǎn)移潛力的關(guān)系和作為肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因有待于進(jìn)一步研究.第二部分OPN在大鼠肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程中表達(dá)的研究.為了驗(yàn)證OPN基因同肝癌的關(guān)系并且深入探討OPN基因在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中的動(dòng)態(tài)變化,制備了化學(xué)藥物二乙基亞硝胺(Diethylnitrosamine,DENA)誘導(dǎo)的大鼠肝癌模型并同樣以實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR準(zhǔn)確檢測了OPN基因表達(dá)水平.結(jié)果提示,OPN基因在肝癌模型中逐漸升高,與肝硬化和肝癌的發(fā)
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