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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
檢測(cè)激肽釋放酶9(Kallikrein9,KLK9)基因在肝癌組織中的表達(dá)水平,分析 KLK9基因的表達(dá)與肝癌臨床病理特征(包括患者的年齡、性別、標(biāo)本的大小及肝癌細(xì)胞惡性程度、臨床 TNM分期、以及是否轉(zhuǎn)移和 HBsAg陽性)的關(guān)系及臨床意義。通過檢測(cè) KLK9基因在一株正常肝細(xì)胞及四株惡性程度不同的肝癌細(xì)胞中的表達(dá),研究 KLK9基因的表達(dá)與細(xì)胞惡性程度的關(guān)系。探討 KLK9基因在肝癌的發(fā)生發(fā)展中作用及相關(guān)分子機(jī)制,
2、為肝癌的診斷及生物靶向治療提供理論及數(shù)據(jù)依據(jù)。
方法:
1、收集50例具有完整臨床資料的肝癌組織(術(shù)前無其他惡性腫瘤病史、未經(jīng)放療、化療、生物治療等)及在距離病灶邊緣2cm處切取部分正常肝臟組織作為癌旁對(duì)照組,以及25例因肝內(nèi)膽管結(jié)石及外傷切除部分正常肝組織作為正常對(duì)照組。
2、應(yīng)用免疫組化檢測(cè) KLK9蛋白質(zhì)在肝癌組織(n=50)、癌旁組織(n=50)、正常組織(n=25)中 KLK9蛋白質(zhì)的表達(dá)。分析
3、KLK9蛋白表達(dá)與肝癌臨床病理特征關(guān)系。
3、通過 RT-PCR方法檢測(cè) KLK9基因 mRNA在肝癌組織、癌旁組織及正常肝臟組織中的表達(dá),探討分析 KLK9與肝癌臨床病理特征的聯(lián)系。
4、通過 RT-PCR及 Western Blot方法檢測(cè)一株正常肝細(xì)胞與四株不同惡性程度的肝癌細(xì)胞中 KLK9基因 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)差異,分析 KLK9mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平與肝癌細(xì)胞惡性程度之間的聯(lián)系。
結(jié)果:<
4、br> 1、肝細(xì)胞癌組織中 KLK9 mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)率較癌旁組織及正常肝臟組織中明顯升高,二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、KLK9mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)與肝癌是否轉(zhuǎn)移、分化程度、臨床分期、性別有關(guān)(P≤0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;和患者的年齡、腫瘤的大小以及 HBsAg情況無關(guān)(P>0.05)。
3、KLK9mRNA及蛋白質(zhì)在肝癌細(xì)胞株中的表達(dá)隨著肝癌細(xì)胞惡性程度的升高而升高,在正常肝細(xì)胞株中低
5、度表達(dá)(P≤0.05)。
結(jié)論:
1、KLK9基因 mRNA及蛋白質(zhì)在肝癌組織中的表達(dá)與肝癌組織的惡性程度有關(guān)系,在正常肝臟組織中低度表達(dá),在肝癌組織中高度表達(dá),且肝癌組織惡性程度越高 KLK9表達(dá)水平越高。
2、KLK9基因表達(dá)與肝癌細(xì)胞是否遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān),KLK9在未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的肝癌組織中的表達(dá)更低,KLK9在發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的肝癌組織中的表達(dá)更高。
3、KLK9基因表達(dá)與肝癌患者性別有關(guān)系,KL
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