植物乳桿菌乳酸脫氫酶發(fā)酵與提取方法研究.pdf

1、乳酸脫氫酶(LDH)廣泛存在于動(dòng)物組織、細(xì)菌和植物中，是生物體內(nèi)糖酵解過(guò)程中重要的氧化還原酶，催化丙酮酸向乳酸的轉(zhuǎn)化，是重要的診斷試劑用酶。本文以乳酸脫氫酶的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用為目的，對(duì)自篩菌株植物乳桿菌RS2-2進(jìn)行紫外誘變選育高產(chǎn)菌株，重新優(yōu)化產(chǎn)酶條件，提高LDH發(fā)酵單位，進(jìn)行了植物乳桿菌發(fā)酵生產(chǎn)LDH1.5m3發(fā)酵罐的中試研究，并對(duì)連續(xù)發(fā)酵產(chǎn)酶條件進(jìn)行了初步研究。經(jīng)過(guò)紫外誘變和發(fā)酵條件優(yōu)化，菌體酶活比出發(fā)菌株提高了69.3％。在25L罐發(fā)

2、酵成功的基礎(chǔ)上進(jìn)行了1.5m3發(fā)酵罐的中試實(shí)驗(yàn)并取得了成功，酶活達(dá)到了1300U/g。 對(duì)適合工業(yè)化生產(chǎn)的菌體破碎條件進(jìn)行了研究。根據(jù)菌體特點(diǎn)重點(diǎn)考察了高壓均質(zhì)破碎法和溶菌酶破碎法的酶活釋放情況，確定高壓均質(zhì)破碎和溶菌酶破碎的最佳工藝條件。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)單獨(dú)的高壓均質(zhì)處理和溶菌酶處理都不能夠滿足菌體破碎要求。采用溶菌酶復(fù)合高壓均質(zhì)處理的方法能夠使菌體破碎效果更佳，破碎菌體酶活釋放量達(dá)到1400U/g。 考察了LDH酶液和凍干粉