乳酸脫氫酶C4活性檢測及其與男性不育的關(guān)系.pdf

1、近幾十年，全球范圍內(nèi)育齡男性的精液質(zhì)量呈下降趨勢，男性不育已成為世界性重要衛(wèi)生健康問題。而男性不育中，除少部分病因已知外，60％～75%的原因并不明確，給不育癥的臨床診療帶來極大困難。
　　乳酸脫氫酶C4（lactate dehydrogenase C4，LDH-C4），是上世紀(jì)60年代由Goldberg等和另一個研究小組發(fā)現(xiàn)的乳酸脫氫酶同工酶之一，可催化丙酮酸和乳酸之間的可逆性反應(yīng)。LDH-C4表達(dá)具有很高的組織特異性，主要存在

2、于哺乳動物發(fā)育成熟的睪丸和精子中，是精子能量代謝的一個關(guān)鍵酶，與精子的生成、代謝及獲能等過程有密切關(guān)系。本課題組曾提出：不明原因不育患者中，有一部分是由精子LDH-C4活性降低引起的，并且存在LDH-C4的表達(dá)下降，導(dǎo)致酶活性異常，從而影響精子的運(yùn)動和功能，最終導(dǎo)致不育。
　　目前國內(nèi)缺少LDH-C4活性異常在男性不育診斷中的大樣本比例統(tǒng)計。本研究檢測了1000例不明原因不育男性的精子LDH-C4活性，計算活性異?；颊叩谋壤l(fā)現(xiàn)

3、LDH-C4活性降低患者約占所有不明原因不育患者的11.5%。同時，本研究初步探討 LDH-C4活性與患者其他有關(guān)臨床指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果顯示LDH-C4活性與精子活力呈正相關(guān)，而與精漿彈性硬蛋白酶、頂體酶活性、乙肝病毒DNA含量及精子ROS含量等無明顯相關(guān)性。為探討LDH-C4活性降低的原因，本研究采用實(shí)時定量PCR、免疫熒光以及Western blot技術(shù)，檢測LDH-C4活性降低患者精子LDH-C4 mRNA及蛋白的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)

4、現(xiàn)LDH-C4活性降低患者存在LDH-C4 mRNA和蛋白水平的表達(dá)下降。本研究采用草氨酸鈉（sodium oxamate）特異性抑制LDH-C4活性，模擬精子LDH-C4活性異常狀態(tài)，并通過計算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)（CASA）及精子獲能試驗(yàn)，研究LDH-C4活性下降對精子運(yùn)動及功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LDH-C4活性缺失患者及活性抑制的精子均存在運(yùn)動和獲能異常。
　　本研究進(jìn)一步證明LDH-C4活性異常是導(dǎo)致男性不育的可能原因之一，