胃疼寧膠囊急性毒性、長(zhǎng)期毒性安全性評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的：通過(guò)開(kāi)展胃疼寧膠囊急性毒性實(shí)驗(yàn)研究及長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)胃疼寧膠囊的臨床前安全性作出評(píng)價(jià)。
　　方法：急性毒性實(shí)驗(yàn)研究中，選用清潔級(jí) KM小鼠，以胃疼寧膠囊的最大配制濃度0.67g/ml及按0.4ml/10g的最大給藥量單次灌胃給藥，與溶媒對(duì)照組(0.1％CMC-Na溶液)和空白組(0.9%的生理鹽水)作比較，持續(xù)密切觀(guān)察14天，記錄小鼠的一般行為、體重、飲食飲水量、活動(dòng)度、毒性反應(yīng)及其死亡率。長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)研究中，將 SD大

2、鼠用 Excel隨機(jī)分組法分為6組，每組30只，雌雄各半，分別為空白對(duì)照組(0.9%的生理鹽水)、溶媒對(duì)照組(0.1%CMC-Na溶液)、陽(yáng)性對(duì)照組(以0.1%CMC-Na溶液為助溶劑配制成的胃疼寧片溶液)、胃疼寧膠囊低劑量組(2.31g/kg.bw)、中劑量組(4.62g/kg.bw)和高劑量組(6.93g/kg.bw)。每天定時(shí)灌胃給藥1次，每周給藥6天，連續(xù)灌胃給藥90天。每周稱(chēng)其體重1次，并根據(jù)體重調(diào)整給藥量，每天進(jìn)行籠旁觀(guān)察，

3、記錄大鼠的一般行為狀態(tài)。于給藥期第90天和停藥后恢復(fù)期14天結(jié)束時(shí)分別處死2/3(20只)、1/3(10只)(每組雌雄各半)的動(dòng)物，采用腹主動(dòng)脈采血進(jìn)行血液學(xué)、血液生化學(xué)、凝血功能等指標(biāo)檢測(cè)，肉眼觀(guān)察動(dòng)物臟器組織，并稱(chēng)其濕重，以及做常規(guī)病理組織學(xué)檢查。
　　結(jié)果：急性毒性最大給藥量實(shí)驗(yàn)研究表明，小鼠給予胃疼寧膠囊的最大給藥量是26.8g/kg，小鼠沒(méi)有出現(xiàn)死亡和一般行為的異常，與空白對(duì)照組、溶媒對(duì)照組相比體重沒(méi)有顯著性差異(P＞0

4、.05)。
　　長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期中大鼠沒(méi)有出現(xiàn)一般行為的異常和死亡情況，各劑量組與各對(duì)照組大鼠的體重相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。說(shuō)明胃疼寧膠囊對(duì)動(dòng)物的正常機(jī)能代謝無(wú)明顯影響。
　　血液學(xué)中，實(shí)驗(yàn)給藥期有幾類(lèi)紅細(xì)胞類(lèi)指標(biāo)和白細(xì)胞類(lèi)指標(biāo)與溶媒對(duì)照組相比較有顯著性差異，分別為高劑量組血紅蛋白(HGB)雌性偏低(P＜0.05)、雄性偏高(P＜0.01)，血小板平均體積(MPV)雌性偏高(P＜0.05)，網(wǎng)

5、織紅細(xì)胞(Ret)雌性偏低(P＜0.05)，紅細(xì)胞壓積(PCT)雄性偏低(P＜0.01)，單核細(xì)胞數(shù)(MONO＃)雄性偏低(P＜0.01)，中性粒細(xì)胞數(shù)比率(NEUT%)雄性偏低(P＜0.01)，PT百分活動(dòng)度(PT%)雌性偏高(P＜0.01)；中劑量組血小板平均體積分布寬度(PDW)雌性偏高(P＜0.01)，大型血小板比率(P-LCR)雌性偏高(P＜0.01)，平均血紅蛋白含量(MCV)雄性偏高(P＜0.01)；停藥后恢復(fù)期雄性高劑量

6、組嗜酸性細(xì)胞比率(EO%)，紅細(xì)胞(RBC)，紅細(xì)胞平均體積(MCV)，凝血酶原時(shí)間(PT)與溶媒對(duì)照組比較有顯著性差異(P＞0.05)，但是其數(shù)值的波動(dòng)均在動(dòng)物正常生理參考值范圍之內(nèi)，這可能是動(dòng)物的一過(guò)性引起，故說(shuō)明胃疼寧膠囊對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)無(wú)明顯不良影響。
　　血液生化學(xué)中，實(shí)驗(yàn)給藥期有幾類(lèi)肝功能和腎功能指標(biāo)與溶媒對(duì)照組比較有顯著性差異，分別為高劑量組谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)雌性偏低(P＜0.01)、雄性偏低(P＜0.01)，堿性

7、磷酸激酶(ALP)雌性偏低(P＜0.01)，總膽紅素(TBIL)雌性偏高(P＜0.01)，甘油三酯(TG)雌性偏低(P＜0.01)；中劑量組總蛋白(TP)雌性偏低(P＜0.01)，白蛋白(ALB)雌性偏高(P＜0.01)，葡萄糖(GLU)雄性偏高(P＜0.05)；低劑量組尿素(UREA)雌性偏高(P＜0.01)，氯離子濃度(Cl-)雌性偏低(P＜0.01)；停藥后恢復(fù)期雌性高劑量組白蛋白(ALB)雌性偏高(P＜0.05)與溶媒對(duì)照組有顯

8、著性差異，但與空白對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異；中劑量組葡萄糖(GLU)雌性偏高(P＜0.05)與溶媒對(duì)照組比較有顯著性差異，但高劑量組葡萄糖偏低，兩者之間無(wú)量效關(guān)系且均在正常參考值范圍內(nèi)波動(dòng)，上述指標(biāo)雖有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義但無(wú)生物學(xué)意義，故說(shuō)明胃疼寧膠囊對(duì)大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)無(wú)明顯不良影響。
　　臟器系統(tǒng)中，除了實(shí)驗(yàn)給藥期雌性高劑量組肝臟系數(shù)偏高(P＜0.05)、脾臟系數(shù)偏低(P＜0.05)，其余各劑量組雌、雄大鼠的各項(xiàng)臟器濕重系數(shù)與溶媒對(duì)照組

9、均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在停藥后恢復(fù)期也未出現(xiàn)肝臟偏高及脾臟系數(shù)偏低的現(xiàn)象，且對(duì)其做常規(guī)病理組織學(xué)檢查，光鏡下觀(guān)察無(wú)病理改變；恢復(fù)期雌性溶媒組卵巢偏大，個(gè)別雌性大鼠處于排卵期，病理組織學(xué)觀(guān)察明顯可見(jiàn)各級(jí)卵泡；雌性高劑量組肺臟系數(shù)略小，但在正常參考值范圍內(nèi)波動(dòng)，雖有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義而無(wú)生理學(xué)意義，所以該藥物無(wú)延遲性毒性反應(yīng)，故說(shuō)明胃疼寧膠囊對(duì)大鼠臟器系數(shù)無(wú)明顯影響。
　　病理組織學(xué)中，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大體解剖，肉眼觀(guān)察實(shí)驗(yàn)給藥期及恢復(fù)期

10、各對(duì)照組和各給藥組未見(jiàn)明顯病理改變。光鏡下觀(guān)察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)給藥期有脾充血10例，肺充血9例，由于各對(duì)照組和給藥組都存在這一現(xiàn)象，且只見(jiàn)血管擴(kuò)張，未見(jiàn)含鐵血黃素沉積，說(shuō)明只是一時(shí)性，可能與處死動(dòng)物方法及取材有關(guān)，與藥物作用沒(méi)有明顯關(guān)系。實(shí)驗(yàn)給藥期各劑量組及各對(duì)照組各有1例間質(zhì)性肺炎、空白對(duì)照組1例可見(jiàn)氣管周?chē)^多淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，考慮其原因可能和飼養(yǎng)環(huán)境或長(zhǎng)期灌胃刺激有關(guān)，而引起的動(dòng)物疾病。高劑量組有1例食管壁有含鐵血黃素沉積，說(shuō)明有陳舊性出血，

11、可能是長(zhǎng)期灌胃操作不當(dāng)所致。實(shí)驗(yàn)給藥期有5例腸黏膜慢性炎，由于各對(duì)照組和各劑量組光鏡下觀(guān)察均可見(jiàn)動(dòng)物腸管壁有不同程度的非特異性炎癥及腸道黏膜上皮細(xì)胞脫落等現(xiàn)象，這可能是長(zhǎng)期灌胃操作刺激或取材時(shí)操作不當(dāng)引起的黏膜脫落，故可認(rèn)為胃疼寧膠囊對(duì)大鼠腸道無(wú)損害性改變。低劑量組有1例雌性動(dòng)物卵巢有濾泡囊腫，屬于大鼠的一種自發(fā)性疾病。除上述臟器組織光鏡下察有明顯改變外，其余各劑量組和各對(duì)照組動(dòng)物臟器組織學(xué)檢查未見(jiàn)明顯病理改變。
　　結(jié)論：急性毒