十一酸睪酮對大鼠肛提肌衛(wèi)星細(xì)胞結(jié)蛋白的影響.pdf

1、目的：探討不同濃度的雄激素對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞中結(jié)蛋白基因及結(jié)蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法：采用酶消化法原代培養(yǎng)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長，通過desmin及α-actin免疫熒光法對培養(yǎng)的骨骼肌細(xì)胞進(jìn)行鑒定。選用原代培養(yǎng)3～4天的骨骼肌細(xì)胞，隨機(jī)分成0組（空白對照組）、1組（0.01×10-3ng/ul雄激素組）、2組（0.04×10-3ng/ul雄激素組）、3組（0.16×10-3ng/ul雄激素組）、4組(0

2、.64×10-3ng/ul雄激素組)、5組（1×10-3ng/ul雄激素組）。培養(yǎng)終止后，在倒置相差顯微鏡下觀察骨骼肌細(xì)胞形態(tài)的變化。應(yīng)用半定量PCR及Westernblotting測定骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞中結(jié)蛋白基因及結(jié)蛋白含量的表達(dá)。
　　 結(jié)果：肛提肌衛(wèi)星細(xì)胞呈圓形，少部分細(xì)胞不規(guī)則，形態(tài)學(xué)上與成纖維細(xì)胞相似。各組細(xì)胞結(jié)蛋白mRNA/GAPDHmRNA值：0組：1.093+0.003；1組：1.470+0.003；2組：1.69

3、1+0.004；3組：2.216+0.005；4組：2.731+0.003；5組：3.205+0.004。各組細(xì)胞結(jié)蛋白/GAPDH表達(dá)的值：0組：1.120+0.007；1組：1.374+0.005；2組：1.395+0.004；3組：1.446+0.005；4組：1.685+0.006；5組：1.835+0.006。在女性正常生理范圍內(nèi)，隨雄激素濃度的增加，結(jié)蛋白基因表達(dá)增強(qiáng)，結(jié)蛋白表達(dá)增多。
　　 結(jié)論：雄激素能促進(jìn)結(jié)蛋白