雙酚A對大鼠未成熟Leydig細胞睪酮合成的影響及機制.pdf

1、目的:觀察雙酚A對大鼠未成熟Leydig細胞睪酮合成的影響,探討雙酚A對大鼠睪丸Leydig細胞GR、11β-HSD1及StAR蛋白表達的影響,探討雙酚A對大鼠睪丸Leydig細胞類固醇激素代謝關(guān)鍵酶的影響。
　　 方法:出生后第21天雄性Sprague-Dawley大鼠24只根據(jù)體重隨機分成4組:正常對照組6只、雙酚A低劑量組6只(2.4ug/Kg)、中劑量組6只(1mg/Kg)、高劑量組6只(200mg/Kg)。每天早晨8:

2、00-10:00以不同劑量的雙酚A給大鼠灌胃(對照組以玉米油灌胃),每次灌胃體積為5ml/kg。出生后第35天染毒結(jié)束時處死大鼠,測量大鼠體重、睪丸重；光鏡、電鏡下觀察睪丸Leydig細胞形態(tài)學(xué)改變；酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清睪酮濃度；免疫組織化學(xué)檢測Leydig細胞11β-HSD1及StAR蛋白；Western-blotting檢測Leydig細胞GR、11β-HSD1及StAR的蛋白表達水平；逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測睪丸Leydig

3、細胞類固醇激素代謝關(guān)鍵酶StAR、P450scc、3β-HSD、P450c17、17β-HSD及P450arom的mRNA表達水平。
　　 結(jié)果:
　　 1.大鼠體重及睪丸重的檢測
　　 不同雙酚A劑量組大鼠體重,睪丸重及睪丸體重比與正常組對比無顯著性差異。
　　 2.大鼠睪丸Leydig細胞光鏡檢查結(jié)果
　　 不同雙酚A劑量組大鼠睪丸Leydig細胞光鏡結(jié)果均未見明顯異常。
　　 3.大

4、鼠睪丸Leydig細胞電鏡檢查結(jié)果
　　 高劑量組大鼠睪丸Leydig細胞線粒體腫脹明顯。
　　 4.大鼠血清睪酮水平
　　 低劑量組大鼠血清睪酮下降(P<0.05)。
　　 5.免疫組織化學(xué)實驗結(jié)果
　　 11β-HSD1及StAR蛋白在各劑量組大鼠睪丸Leydig細胞胞漿表達陽性。
　　 6.大鼠睪丸Leydig細胞GR、11β-HSD1及StAR的蛋白表達水平中、高劑量組大鼠睪丸Le

5、ydig細胞GR蛋白表達明顯降低(P<0.01),低劑量組的大鼠睪丸Leydig細胞GR蛋白表達升高(P<0.05)。高劑量組大鼠睪丸Leydig細胞11β-HSD1(P<0.01)及StAR(P<0.05)蛋白表達降低。
　　 7.大鼠睪丸Leydig細胞StAR、P450scc、3β-HSD、P450c17、17β-HSD及P450arom的mRNA表達水平
　　 低劑量組P450scc及3β-HSD mRNA表達水

6、平下降(P<0.05)。中劑量組各關(guān)鍵酶mRNA表達水平未見明顯改變。高劑量組StAR及17β-HSD mRNA表達水平下降(P<0.05),而3β-HSD mRNA表達水平升高(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.低劑量雙酚A可以抑制大鼠未成熟Leydig細胞的睪酮合成。其機制可能是GR蛋白表達升高,抑制P450scc及3β-HSD mRNA的表達。
　　 2.中劑量雙酚A可以抑制GR蛋白表達,但對類固醇