大腸癌CHFR、FHIT基因甲基化狀態(tài)的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、背景與目的:
  大腸癌是人體消化道中最多見(jiàn)的惡性腫瘤之一,發(fā)病率在腫瘤中靠前,在所有死亡的腫瘤患者中,大腸癌的比例大約十分之一,早期發(fā)現(xiàn)的大腸癌手術(shù)效果極好,部分患者可以長(zhǎng)期存活,但在現(xiàn)實(shí)中,因大腸癌的早期癥狀不明顯,導(dǎo)致患者無(wú)法早期檢查,至中晚期才有典型癥狀,此時(shí)檢查多數(shù)已發(fā)張到中晚期,預(yù)后極差。為了減少大腸癌的死亡率,首先要做到早期發(fā)現(xiàn),早期治療,人們所做研究就是為了發(fā)現(xiàn)大腸癌的發(fā)病機(jī)制,發(fā)病原理,從而做到早期發(fā)現(xiàn),改善患者

2、的預(yù)后。腫瘤的形成有多種因素參與,是體內(nèi)各方作用的結(jié)果,目前眾多的研究提示,在腫瘤的形成過(guò)程中,表觀遺傳修飾發(fā)揮了很大的作用。表觀遺傳修飾有多種表現(xiàn)形式,人們發(fā)現(xiàn)最早的是DNA的甲基化,異常甲基化會(huì)影響到抑癌基因及促癌基因的功能,從而影響腫瘤的形成,目前的臨床試驗(yàn)研究表明,大腸癌中有多個(gè)基因的高甲基化。CHFR(Checkpoint with FHA and Ring Finger),是seolniek和HalazonetiS于14年前

3、通過(guò)先進(jìn)的基因技術(shù),發(fā)現(xiàn)的一種新基因,該基因可以控制正常細(xì)胞的分裂,并能對(duì)分裂期細(xì)胞的分裂情況做到監(jiān)控,該基因因可以控制正常細(xì)胞分裂,所以具有抑制癌癥的作用,有很多基因的檢測(cè)點(diǎn)位于有絲分裂的前期,該基因是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的。CHFR是人體中的忠誠(chéng)衛(wèi)士,它的基因順列及功能非常穩(wěn)定,分布在人體的各個(gè)組織。研究表明,在胃癌、乳腺癌、肝癌、白血病[7]等多種腫瘤的發(fā)生有許多的因素,而CHFR功能下降是其中重要的原始因素,目前的研究證明,CHFR功能

4、下降與CpG島的甲基化有密切關(guān)系,在對(duì)胃癌、乳腺癌等腫瘤中,CHFR的研究非常多,大腸癌研究少,需要我們做更多的工作。脆性組氨基酸三聯(lián)(FragiIe Histidine Triad,F(xiàn)HIT)基因是人體內(nèi)眾多抑癌基因之一,它的特殊之處在于它通過(guò)脆性位點(diǎn)影響腫瘤的發(fā)生,是人們最早發(fā)現(xiàn)的該類(lèi)基因之一。研究發(fā)現(xiàn):“在多種腫瘤的標(biāo)本中, FHIT基因的啟動(dòng)子區(qū)出現(xiàn)異常高甲基化”。本實(shí)驗(yàn)利用PCR分別檢測(cè)FHIT在癌組織及癌旁組織異常甲基化的概

5、率,并檢測(cè)CHFR在癌組織及癌旁組織異常甲基化的概率,旨在為了發(fā)現(xiàn)大腸癌發(fā)生的基因基礎(chǔ)及發(fā)病機(jī)理,并從中發(fā)現(xiàn)FHIT和CHFR基因在大腸癌的發(fā)生中所起的作用。
  方法:
  1.本實(shí)驗(yàn)采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)的方法檢測(cè),大腸癌組織和癌旁正常組織各46例,主要檢測(cè) CHFR基因和FHIT基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化水平,并分析兩基因甲基化水平與年齡、性別、腫瘤部位、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期之間的關(guān)系以及CHFR基

6、因和FHIT基因甲基化水平的相關(guān)性。
  2.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理利用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用χ2檢驗(yàn)和spearman關(guān)聯(lián)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)果:
  1.CHFR基因在大腸癌組織和癌旁正常組織中的甲基化率分別為49.15%、8.69%差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.24,P<0.05);其甲基化水平與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05),而與性別、年齡、腫瘤部位及

7、臨床分期無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。
  2.FHIT基因在大腸癌組織和癌旁正常組織中的甲基化率分別為54.35%、13.04%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.21,P<0.05);其甲基化水平與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著相關(guān)(P<0.05),而與年齡、性別、腫瘤部位及臨床分期無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。
  3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示:大腸癌CHFR和FHIT基因甲基化發(fā)生率呈正相關(guān)(r=0.393,P<0.05)。

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