腦挫裂傷致皮質(zhì)神經(jīng)元形態(tài)和Bcl-2 mRNA的變化及川芎嗪尼莫地平對(duì)其影響.pdf

1、目的：研究局灶性腦挫裂傷后大腦皮質(zhì)神經(jīng)元形態(tài)變化，探討川芎嗪、川芎嗪和尼莫地平聯(lián)合用藥對(duì)腦挫裂傷神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2mRNA表達(dá)的調(diào)控機(jī)制， 方法：采用Feeney自由落體撞擊法建立急性局灶性腦挫裂傷動(dòng)物模型。取80只Wistar成年大鼠隨機(jī)分為6組。正常對(duì)照組(Normalcontrol，N)；模型對(duì)照組(Modelcontrol，M)；川芎嗪小劑量組(Tetramethylpyrazinecontrol，TMPI)

2、；川芎嗪大劑量組(Tetramethylpyrazinecontrol，TMPII)；川芎嗪+尼莫地平小劑量組(TetramethylpyrazineandNimodipinecontrol，TANI)；川芎嗪+尼莫地平大劑量組(TetramethylpyrazineandNimodipinecontrol，TANII)；其中N、M組各10只，TMPI、TMPII、TANI、TANII每組各15只。TMPI組術(shù)前30min注射川芎嗪(0

3、.36mg/100g)，術(shù)后8h再次注射等劑量川芎嗪，TMPII組術(shù)前、后注射等劑量川芎嗪(0.72mg/100g)，TANI組術(shù)前30min注射川芎嗪(0.36mg/100g)，術(shù)后8h再次注射等劑量川芎嗪及尼莫地平(0.5mg/100g)，TANII組術(shù)前注射川芎嗪(0.72mg/100g)，術(shù)后注射等劑量川芎嗪及尼莫地平(1.0mg/100g)。術(shù)中無(wú)菌術(shù)將實(shí)驗(yàn)組大鼠右側(cè)顱頂骨造骨窗，落體750g/cm2作用力，致右側(cè)頂葉大腦皮質(zhì)

4、挫傷。N組不致傷不注藥，M組致傷不注藥。術(shù)后32h取材，常規(guī)石蠟切片和HE染色，原位雜交法檢測(cè)Bcl-2mRNA，并進(jìn)行圖像分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。 結(jié)果：1N組：大鼠腦組織冠狀切面左右對(duì)稱。大腦皮質(zhì)、胼胝體、紋狀體等結(jié)構(gòu)清晰，分界明顯。大腦皮質(zhì)神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分布有序，雖然皮質(zhì)細(xì)胞分層界限不夠清楚，但神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞十分豐富，明顯可見(jiàn)。尤其是星形和錐形神經(jīng)元結(jié)構(gòu)十分清晰，它們核大而圓，異染色質(zhì)少，故胞核呈空泡狀，核仁

5、大而且嗜酸性；神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞小，胞核著色較深。神經(jīng)纖維纖細(xì)，在HE染色時(shí)不夠明顯。Bcl-2mRNA原位雜交染色可見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞少，著色淺。2M組：在皮質(zhì)灶性出血和腦組織缺損區(qū)周邊有大量積液而致腦組織呈疏松網(wǎng)狀。神經(jīng)元水腫胞質(zhì)呈空泡明亮環(huán)狀，胞核異染色質(zhì)增多，嗜堿性增強(qiáng)，有些胞核固縮。此區(qū)細(xì)胞相對(duì)減少。灶周邊以中心區(qū)向外約0.5mm處則見(jiàn)組織水腫減輕，但神經(jīng)元仍有水腫現(xiàn)象，此區(qū)乃人們所說(shuō)的“半暗帶”。神經(jīng)元具有可恢復(fù)性。Bcl-2mRNA陽(yáng)性

6、細(xì)胞數(shù)密度較正常組增多，著色較深，灰度值降低(p均＜0.01)。3TMPI、TMPII組：HE染色切片上病灶區(qū)形態(tài)和模型組無(wú)顯著差異。在“半暗帶”神經(jīng)元水腫明顯減輕。神經(jīng)元周?chē)[帶明顯縮小。Bcl-2mRNA原位雜交陽(yáng)性細(xì)胞增多，著色加深，灰度值降低。4TANI、TANII組：HE染色可見(jiàn)病灶中心仍有明顯出血，灶周區(qū)水腫無(wú)明顯減輕，而神經(jīng)元胞質(zhì)水腫明顯好轉(zhuǎn)。Bcl-2mRNA原位雜交陽(yáng)性細(xì)胞明顯增多，著色加深，灰度值降低(p均＜0.0