FCGR3B基因拷貝數(shù)變異與河南漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關性研究.pdf

1、引言:
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種嚴重的自身免疫性疾病，常累及多個器官，以B細胞過度活化和抗原抗體免疫復合物形成為特點。好發(fā)于育齡期婦女，發(fā)病高峰年齡為15-40歲，男女的患病率之比約為1∶9。系統(tǒng)性紅斑狼瘡病程以復發(fā)和緩解交替為特點，多需要終生治療，對社會、患者家庭都造成了很大的經濟負擔和精神心理壓力，嚴重危害著人類的健康。對于其發(fā)病機制的研究從未停歇過，但目前尚未完全闡明。隨著全基因組研究技術的開展和其他基因變異的發(fā)現(xiàn)，目前對S

2、LE的發(fā)病機制有了更進一步的認識。越來越多的證據(jù)表明遺傳因素在SLE發(fā)病中起主要作用[1-3]，環(huán)境因素、感染因素及雌激素等因素可能只是SLE發(fā)病的誘發(fā)因素。
　　在過去十年，人類全基因組相關性研究(Genome-wideassociationstudies,GWAS)發(fā)現(xiàn)了許多與人類疾病相關的SNPs，但是目前已經發(fā)現(xiàn)的SNPs僅能解釋一小部分常見疾病的遺傳因素，目前對于那些無法解釋的遺傳原因有很多相關推測。染色體的重組能導致一

3、些特殊的疾病和癥狀[4],最近的一些報道提示基因拷貝數(shù)變異在一些疾病的易感性中有一定作用。如Borozdin等人發(fā)現(xiàn)的低CCL3L1基因拷貝數(shù)是HIV感染的易感因素[5]，Hollox等人的研究認為高的DEFB基因拷貝數(shù)是銀屑病很強的易感因素[6]，另外一個研究發(fā)現(xiàn)低HBD-2基因拷貝數(shù)是潰瘍性結腸炎的危險因素[7]?？截悢?shù)變異(Copynumbervariation，CNV)被定義為一個DNA片段大小范圍從1kb到3Mb的亞微觀突變，

4、是一可能具有致病性、良性或未知臨床意義的基因組改變。
　　關于基因拷貝數(shù)變異在SLE中的研究，目前已發(fā)現(xiàn)了許多與SLE發(fā)病相關的基因。這對進一步解釋SLE的發(fā)病機制意義重大。CCL3L1、FCGR3B、Toll樣受體7、組胺H4受體、補體C4等基因拷貝數(shù)變異被認為可能與SLE發(fā)病相關[8-12]，但目前此方面的證據(jù)并不十分充足，研究結論也爭議較大。因此，為進一步確認FCGR3B基因拷貝數(shù)變異是否和河南漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡及狼瘡腎炎發(fā)

5、病相關，本研究收集了329例河南漢族SLE患者和328例健康對照者臨床、實驗室資料及血標本，檢測其FCGR3B基因拷貝數(shù)，并分析FCGR3B基因拷貝數(shù)變異對系統(tǒng)性紅斑狼瘡及狼瘡腎炎疾病的影響及與系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床表型的相關性。
　　目的:
　　1.了解FCGR3B基因拷貝數(shù)在河南漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡及正常人群分布情況。
　　2.探討FCGR3B基因拷貝數(shù)變異與河南漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡和狼瘡腎炎易感性的關系及其與臨床表型是否

6、存在相關性。
　　方法:
　　1.收集2010-2012年間就診于鄭州大學第一附屬醫(yī)院腎病風濕科的SLE患者329例，健康對照者為來自鄭州大學學生志愿者和鄭州大學第一附屬醫(yī)院健康體檢科的健康志愿者，共328例。收集所有患者的臨床表現(xiàn)和實驗室檢查結果及其病理類型。采集患者和健康對照者血標本。應用GentraPuregeneBloodKit提取患者及健康對照者DNA，置于-80℃冰箱保存。
　　2.應用改良的競爭性PCR方

7、法AccuCopyTM多重基因拷貝數(shù)檢測技術檢測患者和健康對照者FCGR3B基因拷貝數(shù)。SLE患者按有無腎臟損害、病理類型、疾病活動度、性別進行分組，然后分析組間拷貝數(shù)分布有無差異。再分析FCGR3B基因拷貝數(shù)對疾病易感性的影響及和臨床表型的關系。
　　3.應用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。兩樣本間定量資料的比較用t檢驗或Mann-whitneyU檢驗。FCGR3B基因拷貝數(shù)與患者臨床表型間的相關性分析用x2檢驗。Logist

8、ic回歸分析法分析FCGR3B基因拷貝數(shù)與SLE或LN的疾病易感性的關系，并計算相對風險比(OR)和95％可信區(qū)間。P＜0.05被認為有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1.FCGR3B基因拷貝數(shù)在河南漢族SLE患者和健康對照者中的分布:SLE患者和健康對照者FCGR3B拷貝數(shù)為1-4不等，平均拷貝數(shù)均為2拷貝。兩組間拷貝數(shù)分布無差異(P=0.434)。分別按性別、有無腎臟損害、SLEDAI進行分層，結果均未發(fā)現(xiàn)拷貝數(shù)分布有差異

9、(P＞0.05)。
　　2.LN患者中FCGR3B基因拷貝數(shù)分布情況:本研究中共有LN患者142例，另外分析了LN患者和健康對照者拷貝數(shù)分布情況，結果發(fā)現(xiàn)兩組間分布差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。分別根據(jù)LN患者腎臟病理類型、AI、CI分組，同樣未發(fā)現(xiàn)兩組之間FCGR3B基因拷貝數(shù)分布有統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　3.FCGR3B基因拷貝數(shù)變異對系統(tǒng)性紅斑狼瘡風險分析:以平均拷貝數(shù)2為界，把SLE患者分為低拷貝數(shù)組(

10、＜2)和高拷貝數(shù)組(＞2)。Logistic回歸分析法分析FCGR3B拷貝數(shù)對SLE疾病的風險性。結果發(fā)現(xiàn)高FCGR3B基因拷貝數(shù)組(OR=0.900;95％CI:0.622-1.302;P=0.576)和低FCGR3B基因拷貝數(shù)組(OR=1.321;95％CI:0.781-2.234;P=0.298)對SLE易感性均無影響。
　　4.FCGR3B基因拷貝數(shù)變異對狼瘡腎炎風險分析:同樣的方法把LN患者分為低拷貝數(shù)組(＜2)和高拷貝

11、數(shù)組(＞2)。結果發(fā)現(xiàn)高拷貝數(shù)與LN的疾病易感性不相關(OR=1.119;95％CI:0.700-1.789;P=0.638)，而低拷貝數(shù)是LN患者的風險因素（OR=1.919;95％CI:1.034-3.560;P=0.039）。
　　5.FCGR3B基因拷貝數(shù)變異與臨床表型的相關性:x2檢驗分析FCGR3B基因拷貝數(shù)變異與SLE臨床表現(xiàn)、實驗室檢查和免疫學指標間的關系，結果均未發(fā)現(xiàn)有相關性。
　　結論:
　　1.河