基于生物芯片的胃癌預(yù)后相關(guān)分子標(biāo)志物研究.pdf

1、研究背景與目的：胃癌是一種高發(fā)腫瘤。綜合治療能提高進(jìn)展期胃癌的術(shù)后生存率，精確評估胃癌患者的預(yù)后及合理的開展綜合治療是目前臨床工作中急需解決的問題。在本研究中，我們利用基因芯片及抗體芯片技術(shù)篩選及初步驗(yàn)證胃癌預(yù)后相關(guān)蛋白，用免疫組化方法分析其在胃癌組織中的表達(dá)，探討這些蛋白與胃癌的臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。
　　方法：1.分析本課題組的既往的基因表達(dá)譜芯片數(shù)據(jù)結(jié)合近年國際發(fā)表的文獻(xiàn)作為胃癌標(biāo)志物選擇的參考依據(jù)，從中選擇RANTES

2、、IL1B、HOXC6、KGF、TFF3、LOX共6個基因作為候選標(biāo)志物，利用Q-RT-PCR及Westernblot驗(yàn)證其在胃癌組織中的表達(dá)。2.取3對胃癌及癌旁對照組織和10對術(shù)后預(yù)后明顯差異的術(shù)后兩組胃癌石蠟標(biāo)本，采用美國FullMoon生物系統(tǒng)公司的ASB600抗體芯片，初步篩選了胃癌與癌旁正常組織以及術(shù)后預(yù)后差異明顯的相關(guān)的差異表達(dá)蛋白，并選擇部分進(jìn)行WesternBlot驗(yàn)證。選取了ProlactinReceptor、TSP

3、-1作為候選標(biāo)志物。3.選取2002年1月-2003年12月在瑞金醫(yī)院接受胃癌根治術(shù)病例161例，利用保存的石蠟標(biāo)本制作組織芯片。用免疫組化技術(shù)在胃癌組織芯片上探討HOXC6、KGF、TFF3、LOX、ProlactinReceptor、TSP-1在癌及癌旁的表達(dá)，分析其表達(dá)與臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。
　　結(jié)果：1.在胃癌組織中HOXC6、KGF、TF(F)3、LOX四個基因的mRNA和蛋白表達(dá)皆上調(diào)，與本研究所基因芯片和文獻(xiàn)報

4、道的結(jié)果一致。2.抗體芯片的結(jié)果篩選到PRLR在癌組織中有代表性的高表達(dá)，TSP1在預(yù)后差的胃癌樣本中高表達(dá)。3.結(jié)果顯示:161例胃癌組織中腫瘤的浸潤深度，腫瘤大小，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與生存時間相關(guān)(P＜0.05)。免疫組化結(jié)果顯示:KGF在胃癌組織中的表達(dá)與生存時間相關(guān)(P＜0.05);LOX的表達(dá)與浸潤深度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床分期及生存時間相關(guān)(P＜0.05);PRLR蛋白在胃癌中的表達(dá)率為87％，癌旁的表達(dá)12.4％，兩者具有顯著性差異(