中腦VTA-NAc多巴胺獎賞環(huán)路介導imipramine鎮(zhèn)痛效應及其機制研究.pdf

1、目的：抗抑郁藥在治療慢性疼痛中備受青睞，臨床及基礎研究都證實其具有明顯的鎮(zhèn)痛效果。但是抗抑郁藥是如何發(fā)揮鎮(zhèn)痛效應，其機制至今不是很明確。本實驗組研究發(fā)現(xiàn)，中腦VTA-NAc多巴胺獎賞環(huán)路及該環(huán)路中的BDNF參與慢性神經(jīng)病理性疼痛的形成過程。本實驗主要探討中腦VTA-NAc多巴胺獎賞環(huán)路是否參與了imipramine鎮(zhèn)痛效應及其可能的機制。
　　方法：1.觀察慢性注射imipramine的鎮(zhèn)痛作用及其對VTA-NAc環(huán)路興奮性的影響

2、:于CCI術后3天開始腹腔慢性注射imipramine(30mg/kg)，給藥后1，3，7，14天等各個時間點測量小鼠熱縮足潛伏期;依據(jù)行為學選擇適當?shù)臅r間點取材，用免疫組化及Western blot方法分別檢測VTA、NAc區(qū)c-Fos和BDNF的表達。
　　2觀察興奮VTA-NA環(huán)路后對imipramine的鎮(zhèn)痛作用的影響及該環(huán)路中c-Fos蛋白及BDNF表達變化:CCI小鼠經(jīng)腹腔慢性注射imipramine14天后，于CCI

3、對側(cè)VTA注射小劑量的bacolfen或morphine，檢測給藥后各時間點0.5h，1h，2h，4h，8h的疼痛行為學變化;依據(jù)行為學取材分析c-Fos及BDNF的表達變化。
　　3.證實VTA-NAc多巴胺獎賞環(huán)路的BDNF是否介導了imipramine的鎮(zhèn)痛效應:CCI小鼠經(jīng)腹腔慢性注射imipramine14天后，于CCI對側(cè)NAc注射小劑量的外源性BDNF，觀察給藥后慢性imipramine處理的CCI小鼠1h,2h，4

4、h疼痛行為學變化。
　　結果： CCI疼痛小鼠經(jīng)腹腔慢性注射imipramine顯著地抑制了CCI誘發(fā)的熱痛覺過敏行為。給藥后第14天取材，免疫組化分析顯示VTA及NAc區(qū)CCI誘發(fā)的c-Fos表達顯著減少。在CCI對側(cè)的VTA注射小劑量的baclofen(5nM/0.15 ul)和小劑量的morphine（50 nM/0.15 ul），顯著地翻轉(zhuǎn)了丙咪嗪的鎮(zhèn)痛效應;免疫組化檢測結果也顯示，VTA及NAc的c-Fos蛋白表達增加。

5、Western blot分析發(fā)現(xiàn)，CCI疼痛小鼠VTA-NAc環(huán)路的BDNF也被imipramine慢性用藥所抑制;VTA注射小劑量的baclofen或小劑量的morphme后，則翻轉(zhuǎn)了imipramine對BDNF的下調(diào);在VTA多巴胺神經(jīng)元投射區(qū)NAc注射小劑量的外源性BDNF（5ng/0.2 ul），逆轉(zhuǎn)了imipramine的鎮(zhèn)痛作用。
　　結論：中腦VTA-NAc多巴胺獎賞環(huán)路通過調(diào)控BDNF的表達參與了imiprami