鼻咽癌細胞株X射線照射后耐藥性產(chǎn)生的分子作用機制.pdf

1、目的：研究腫瘤細胞接受射線照射后耐藥相關(guān)基因和DNA修復(fù)基因的表達，探討放療后腫瘤細胞產(chǎn)生多藥耐藥的機制，為臨床合理安排腫瘤放化療順序、避免因放療誘導(dǎo)的多藥耐藥，提高腫瘤綜合治療效果提供理論依據(jù)。 方法：選取人系鼻咽癌CNE細胞株，利用X射線作為照射源對該細胞株進行照射。細胞每次接受照射的劑量為2Gy，1次/天，連續(xù)照射5天，照射總劑量為10Gy。每次照射后將細胞放回CO2孵箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)，照射全部結(jié)束后立即收集部分細胞，其余細胞

2、繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞進入對數(shù)生長期后每周收集1次，共收集5次(即照射終止后即刻，1-4W)，凍存?zhèn)溆?。光鏡和透射電鏡下觀察照射前后細胞形態(tài)；采用MTT法檢測照射后細胞對化療藥物順鉑(cDDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)的耐藥性；流式細胞儀檢測細胞周期分布；克隆形成實驗檢測細胞增殖情況；RT-PCR、免疫細胞化學(xué)和Westernblot方法，檢測X射線照射前后細胞株中mdr1、GST-π和p53基因的表達以及hMSH2、hMLH1、MGMT和

3、XRCC1的表達，分析各蛋白表達之間的相關(guān)性，并對表達有變化的基因進行測序。采用SPSS10.0軟件包，對數(shù)據(jù)進行t檢驗和Pearson直線相關(guān)檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 1X射線照射誘導(dǎo)CNE細胞株耐藥蛋白P-gp和GST-π表達。 2X射線照射誘導(dǎo)CNE細胞株DNA修復(fù)基因hMSH2和MGMT 的表達，這可能與照射引起的DNA損傷有關(guān)，并可能增強腫瘤細胞照射后產(chǎn)生的多藥耐藥性。