沙眼衣原體感染的HeLa229細胞Bim表達及抑制凋亡的研究.pdf

1、目的:通過檢測沙眼衣原體(D血清型)感染的Hela229細胞中Bim蛋白質(zhì)的表達水平及凋亡誘導(dǎo)劑作用后的凋亡情況，探討沙眼衣原體感染對宿主細胞凋亡的影響及可能機制，從而為研究沙眼衣原體持續(xù)感染機制、防治沙眼衣原體相關(guān)疾病提供實驗依據(jù)及新的思路。 方法:1.Bim蛋白質(zhì)表達的檢測：采用Western-blot分別檢測沙眼衣原體感染和未感染的Hela229細胞Bim蛋白質(zhì)的表達水平。2.細胞凋亡的檢測：凋亡誘導(dǎo)劑etoposide作

2、用Hela229細胞后，經(jīng)Hoechst33258染色用熒光顯微鏡觀察核濃縮和凋亡小體；瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA Ladder帶；流式細胞儀檢測凋亡率。 結(jié)果:1.Western-blot結(jié)果顯示Hela229細胞在未感染及感染沙眼衣原體6小時后可檢測到Bim的表達，且兩組細胞間Bim表達無明顯差異。在沙眼衣原體感染24小時、48小時后均未檢測到Bim的表達。2.經(jīng)etoposide作用6小時后，未感染沙眼衣原體的Hela22

3、9細胞用熒光顯微鏡觀察到明顯的核濃縮和凋亡小體；瓊脂糖凝膠電泳檢測到DNA Ladder帶；流式細胞儀檢測的凋亡率為90.64％，與未經(jīng)誘導(dǎo)劑作用的Hela229細胞比較有差異(P<0.05)。而沙眼衣原體感染24小時的Hela229細胞，經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑作用6小時后未觀察到核濃縮和凋亡小體以及DNA Ladder帶；流式細胞儀檢測的凋亡率為11.50％，與未感染沙眼衣原體的Hela229細胞誘導(dǎo)后的凋亡率比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；