性成熟前山羊卵泡發(fā)育過程中幾種類固醇生成酶mRNA的表達.pdf

1、哺乳動物繁殖后代的首要事件就是卵泡發(fā)育。卵泡的發(fā)育和分化與類固醇合成能力的增加密切相關(guān)，而類固醇的合成能力依賴于類固醇生成酶細胞色素P450超家族成員的表達和活性。人們已經(jīng)從不同角度研究了不同物種類固醇生成酶的表達，結(jié)果表明類固醇生成酶的表達具有種屬特異性。然而，關(guān)于山羊類固醇合成酶表達尚未見系統(tǒng)研究。本實驗用RT-PCR方法對P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)、P45017α-羥化酶(P450c17)和P450芳香化酶(P45

2、0arom)在山羊卵泡發(fā)育和閉鎖過程中的表達進行了定位和半定量研究。同時，把這三種類固醇生成酶在性成熟前山羊的表達與性成熟山羊的表達進行了比較。 研究結(jié)果表明：1、山羊腔前卵泡不表達P450arom，但表達P450scc和P450c17。這說明山羊腔前卵泡具有合成孕烯醇酮和雄烯二酮的能力，而不具備合成雌二醇的能力。2、0.2-0.5mm有腔卵泡開始表達P450arom，并且繼續(xù)表達P450scc和P450c17；隨著卵泡直徑的增

3、大這三種酶表達量增強。這說明，當卵泡發(fā)育到0.2-0.5mm時已經(jīng)具有合成孕激素、雄激素和雌激素的能力，而且這三種激素的合成能力隨著卵泡直徑的增大而增強。3、卵母細胞不表達P450scc、P450c17和P450arom；卵泡膜細胞表達P450scc和P450c17，但不表達P450arom；卵泡壁顆粒細胞和卵丘細胞都表達P450scc和P450arom，但都不表達P450c17。4、閉鎖卵泡都表達P450scc和P450c17，不表達

4、P450arom；P450scc的表達量與同一直徑健康卵泡的表達量差異不顯著；P450c17的表達量顯著低于同一直徑健康卵泡中的表達量，而且，不同直徑閉鎖卵泡中P450c17的表達沒有差異。這說明卵泡中雄激素合成能力降低和失去雌激素合成能力可能是造成卵泡閉鎖的主要原因。5、P450c17和P450arom在性成熟和性未成熟山羊健康有腔卵泡中的表達模式相似；而P450scc在性成熟山羊黃體期卵巢的大卵泡中表達量顯著低于在性未成熟山羊卵巢和