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文檔簡介
1、冠心病(coronaryheartdisease,CHD)是當今世界上發(fā)病率和死亡率都較高的一類疾病。流行病學調查發(fā)現(xiàn),與其他發(fā)達國家生活方式相同的法國,冠心病的發(fā)病率、死亡率相當?shù)?,這一現(xiàn)象稱為“法蘭西奇跡”(FrenchParadox)。究其原因是因為法國人進餐時飲用適量的紅葡萄酒,進一步研究發(fā)現(xiàn)其中起主要作用的是白藜蘆醇(resveratrol,Res)。白藜蘆醇具有廣泛的生理藥理學作用,如抗氧化、清除自由基作用,抑制血小板聚集,
2、調節(jié)血脂,防止動脈粥樣硬化,抗炎,抗真菌,抗腫瘤,保肝作用等。本實驗主要從兩個方面:舒張血管;減少心肌缺血—再灌注(ischemiareperfusion,I/R)損傷,研究白藜蘆醇的心血管保護作用及其機制。 1.白藜蘆醇對大鼠腹主動脈的舒張作用及其機制本實驗通過制備大鼠腹主動脈血管環(huán)標本,研究白藜蘆醇的舒張血管作用。結果表明,Res對內皮完整及去內皮的血管均有舒張作用,其舒血管機制與ATP敏感的K+通道(K+ATP)及Ca2+
3、激活的K+通道(BKCa)有關,而與M受體、β受體及前列腺素等無關,同時,Res對血管平滑肌細胞的外鈣內流及內鈣釋放均有調節(jié)作用。 2.白藜蘆醇預處理對大鼠在體I/R損傷的保護作用制備大鼠在體模型,測量心臟收縮及舒張功能,心肌梗死范圍;測定血清LDH、心肌NO、MDA、SOD含量;心肌細胞形態(tài)學觀察(HE染色、電鏡觀察);免疫組織化學法結合計算機圖象分析檢測心肌Bcl-2/Bax蛋白的表達。結果表明,白藜蘆醇預處理對I/R后心臟
4、功能的降低有改善作用;減少心肌梗死面積;減少因缺血引起的心肌酶的釋出;增加心肌NO、SOD含量,減少MDA的損傷;可以抑制細胞凋亡的發(fā)生。 3.白藜蘆醇對培養(yǎng)乳鼠心肌細胞模擬I/R損傷的保護作用培養(yǎng)乳鼠心肌細胞,模擬I/R損傷,在此基礎上,①采用臺盼藍穿透法及MTT比色法測定細胞活力,檢測細胞培養(yǎng)液中LDH活性及心肌細胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力,結果表明,Res預處理可提高心肌細胞活力;穩(wěn)定心肌細胞膜,抑制
5、LDH釋放;保護心肌細胞鈉泵和鈣泵功能,減輕再灌注損傷。②采用TUNEL染色法及AnnexinV-FITC/PI雙標記流式細胞術檢測心肌細胞凋亡;底物酶解法檢測caspase-3活性;免疫組織化學法結合計算機圖象分析檢測心肌細胞Bcl-2/Bax蛋白的表達,結果表明,Res可通過促進抗凋亡蛋白Bcl-2的表達、抑制促凋亡蛋白Bax的表達,抑制凋亡過程中關鍵酶caspase-3的活性,減少I/R引起的心肌細胞凋亡。③采用MTT比色法測定細
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