白藜蘆醇心血管保護(hù)作用的研究.pdf

1、冠心病(coronaryheartdisease，CHD)是當(dāng)今世界上發(fā)病率和死亡率都較高的一類疾病。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，與其他發(fā)達(dá)國家生活方式相同的法國，冠心病的發(fā)病率、死亡率相當(dāng)?shù)停@一現(xiàn)象稱為“法蘭西奇跡”(FrenchParadox)。究其原因是因為法國人進(jìn)餐時飲用適量的紅葡萄酒，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其中起主要作用的是白藜蘆醇(resveratrol，Res)。白藜蘆醇具有廣泛的生理藥理學(xué)作用，如抗氧化、清除自由基作用，抑制血小板聚集，

2、調(diào)節(jié)血脂，防止動脈粥樣硬化，抗炎，抗真菌，抗腫瘤，保肝作用等。本實驗主要從兩個方面：舒張血管；減少心肌缺血—再灌注(ischemiareperfusion，I/R)損傷，研究白藜蘆醇的心血管保護(hù)作用及其機(jī)制。 1.白藜蘆醇對大鼠腹主動脈的舒張作用及其機(jī)制本實驗通過制備大鼠腹主動脈血管環(huán)標(biāo)本，研究白藜蘆醇的舒張血管作用。結(jié)果表明，Res對內(nèi)皮完整及去內(nèi)皮的血管均有舒張作用，其舒血管機(jī)制與ATP敏感的K+通道(K+ATP)及Ca2+

3、激活的K+通道(BKCa)有關(guān)，而與M受體、β受體及前列腺素等無關(guān)，同時，Res對血管平滑肌細(xì)胞的外鈣內(nèi)流及內(nèi)鈣釋放均有調(diào)節(jié)作用。 2.白藜蘆醇預(yù)處理對大鼠在體I/R損傷的保護(hù)作用制備大鼠在體模型，測量心臟收縮及舒張功能，心肌梗死范圍；測定血清LDH、心肌NO、MDA、SOD含量；心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察(HE染色、電鏡觀察)；免疫組織化學(xué)法結(jié)合計算機(jī)圖象分析檢測心肌Bcl-2/Bax蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明，白藜蘆醇預(yù)處理對I/R后心臟

4、功能的降低有改善作用；減少心肌梗死面積；減少因缺血引起的心肌酶的釋出；增加心肌NO、SOD含量，減少M(fèi)DA的損傷；可以抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生。 3.白藜蘆醇對培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞模擬I/R損傷的保護(hù)作用培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞，模擬I/R損傷，在此基礎(chǔ)上，①采用臺盼藍(lán)穿透法及MTT比色法測定細(xì)胞活力，檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活性及心肌細(xì)胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力，結(jié)果表明，Res預(yù)處理可提高心肌細(xì)胞活力；穩(wěn)定心肌細(xì)胞膜，抑制

5、LDH釋放；保護(hù)心肌細(xì)胞鈉泵和鈣泵功能，減輕再灌注損傷。②采用TUNEL染色法及AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡；底物酶解法檢測caspase-3活性；免疫組織化學(xué)法結(jié)合計算機(jī)圖象分析檢測心肌細(xì)胞Bcl-2/Bax蛋白的表達(dá)，結(jié)果表明，Res可通過促進(jìn)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)、抑制促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，抑制凋亡過程中關(guān)鍵酶caspase-3的活性，減少I/R引起的心肌細(xì)胞凋亡。③采用MTT比色法測定細(xì)