Snail蛋白表達(dá)與肝細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移.pdf_第1頁(yè)
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1、該論文分為兩部分。
   第一章Snail蛋白在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與臨床意義
   目的:通過(guò)對(duì)Snail在肝癌中表達(dá)的研究來(lái)探索Snail與肝癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系。
   方法:選取湘雅醫(yī)院2010年1月-2011年12月150例手術(shù)切除肝癌標(biāo)本及80例正常肝臟組織標(biāo)本,采用免疫組化SP法研究Snail在150例肝癌標(biāo)本及80例正常肝臟組織標(biāo)本表達(dá)情況。
   結(jié)果:Snail在肝癌中陽(yáng)性表達(dá)率為89

2、.37%,高于正常組織3.75%,兩者間表達(dá)均具有顯著差異性(P<0.05)。Snail表達(dá)與肝癌的腫塊大小、TNM分期、腫瘤分化程度、門(mén)脈癌栓、術(shù)后復(fù)發(fā)呈正相關(guān)(P<0.05),與年齡、性別、AFP水平、Child分級(jí)無(wú)相關(guān)性.Snail陽(yáng)性患者生存期明顯短于陰性患者。
   結(jié)論: Snail間接地表達(dá)了肝癌的惡性程度,與肝癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移有一定的關(guān)系,可作為肝癌惡性程度及肝癌患者預(yù)后的評(píng)估指標(biāo)。
   第二章R

3、NAi抑制Snail基因表達(dá)的作用
   目的:用RNA干擾(RNAinterference,RNAi)技術(shù)抑制轉(zhuǎn)錄因子Snail表達(dá),觀察人肝癌HepG2細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化型和體外侵襲能力的影響。
   方法:構(gòu)建能表達(dá)針對(duì)Snail的小干擾RNA(Smallinterfering RNA,siRNA)的RNA干擾載體(Snail siRNA vector)和表達(dá)不針對(duì)任何已知mRNA的siRNA的陰性對(duì)照RNA干擾

4、載體(control siRNA vector),分別轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,篩選得到Snail表達(dá)受抑制的HepG2-siSnail細(xì)胞和 Snail表達(dá)未受影響的HepG2-siControl細(xì)胞。別采用RT-PCR和Western blot術(shù)檢測(cè)非轉(zhuǎn)染組、HepG2-siSnail、HepG2-siControl三組細(xì)胞Snail、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)和E-cadherin表達(dá),用Boyden chamber模型檢測(cè)細(xì)胞侵

5、襲能力。
   結(jié)果: HepG2-siSnail組與HepG2-nontransfection組相比,Snail和α-SMA表達(dá)顯著減弱(p<0.01),E-cadherin表達(dá)顯著增強(qiáng)(p<0.01),Boyden chamber穿膜細(xì)胞數(shù)顯著減少(p<0.01);HepG2-siControl組Snail、α-SMA和E-cadherin表達(dá)及Boyden chamber穿膜細(xì)胞數(shù)和HepG2-nontransfectio

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