紅景天對大鼠局灶性腦缺血再灌注后GFAP表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過研究紅景天對腦缺血再灌注大鼠皮層及海馬區(qū)缺血神經(jīng)元凋亡以及膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)表達(dá)的影響，探討紅景天對腦缺血再灌注后神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞的保護(hù)作用機(jī)制。 方法：選用健康Wistar大鼠96只采用線栓法建立大腦中動脈缺血再灌注(MCAO/R)大鼠動物模型。隨機(jī)分為正常對照組、假手術(shù)組(sham組)、缺血再灌注(I/R)組及紅景天藥物治療組。缺血再灌注

2、(I/R)組、藥物治療組又分為缺血2小時(shí)再灌注2、6、24、48、72小時(shí)5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各8只大鼠。正常對照組及假手術(shù)組各8只。紅景天藥物治療組：缺血前4周每日早、晚分別按紅景天0.672g/kg(紅景天膠囊用8mL生理鹽水溶解)灌胃。假手術(shù)組及I/R組給予相同劑量生理鹽水灌胃。各時(shí)間點(diǎn)各取7只大鼠取腦后進(jìn)行GFAP免疫組化及HE染色及原位末端標(biāo)記法(TUNEL法)檢測大鼠腦內(nèi)的凋亡細(xì)胞。藥物治療組及I/R組各時(shí)間點(diǎn)各取1只取腦

3、后行TTC染色。假手術(shù)組未插入尼龍線外，手術(shù)過程同I/R組。正常對照組不做任何處理。動物模型建立成功后對動物的神經(jīng)功能進(jìn)行評分，分?jǐn)?shù)在1-4分可入組。并排除蛛網(wǎng)膜下腔出血。術(shù)后蘇醒回籠，自由食水。檢測內(nèi)容有： 1.神經(jīng)功能缺損評分：各組均于腦缺血2h再灌注后6h進(jìn)行：觀察紅景天對各組大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)功能的影響。 2.梗死灶體積的測量：各組均于腦缺血2h再灌注后24h進(jìn)行，觀察紅景天對大鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體

4、積的影響。 3.各組大鼠腦組織GFAP表達(dá)的影響：各組大鼠缺血再灌注后相應(yīng)時(shí)間行免疫組化染色觀察腦組織GFAP表達(dá)。 4.各組大鼠缺血再灌注損傷后神經(jīng)細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的改變：各組大鼠缺血再灌注后相應(yīng)時(shí)間腦組織行TUNEL染色觀察病理形態(tài)學(xué)改變及大腦皮質(zhì)及海馬區(qū)異常神經(jīng)元改變。 結(jié)果：大腦缺血再灌注損傷可誘發(fā)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，并隨著缺血再灌注時(shí)間的延長，大量的凋亡細(xì)胞在I/R組出現(xiàn)，它們分布于大腦各個(gè)區(qū)域，特別是皮質(zhì)