維、漢族婦女宮頸癌及癌前病變組織中HPV16整合狀態(tài)的對(duì)比研究.pdf

1、目的：探索HPV16在宮頸病變進(jìn)展中的作用，分析維吾爾族、漢族宮頸癌發(fā)病機(jī)制的不同特點(diǎn)，尋找維吾爾族HPV低感染率宮頸癌高患病率的原因。
　　方法：收集有宮頸病變的379例維族、464例漢族宮頸活檢標(biāo)本，經(jīng)兩名以上病理科高級(jí)醫(yī)師復(fù)片，確定標(biāo)本的病理類(lèi)型，新鮮標(biāo)本-80℃保存。使用試劑盒提取組織DNA。使用ABI7500PCR儀進(jìn)行雙重實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)各標(biāo)本HPV16存在狀態(tài)，用pCR?-XL-TOPO?3.5kbHPV16質(zhì)粒作標(biāo)準(zhǔn)

2、品，設(shè)計(jì)HPV16E2、E6兩對(duì)引物及Taq探針，同管檢測(cè)HPV16E2、E6，繪制E2、E6雙標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算機(jī)軟件系統(tǒng)實(shí)時(shí)檢測(cè)E2、E6熒光信號(hào)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線及Ct值計(jì)算E2、E6拷貝數(shù)，進(jìn)而求出E2/E6比值判斷HPV16存在狀態(tài)。
　　結(jié)果：1.379例維族宮頸病變患者中檢出122例HPV16陽(yáng)性，包括20例宮頸炎（N），32例CINI,6例CINII，20例CINIII，44例宮頸癌（SCC）;464例漢族宮頸病變患者檢出

3、121例HPV16陽(yáng)性，包括22例宮頸炎（N），34例CINI,7例CINII，28例CINIII，30例宮頸癌（SCC）。2.雙重實(shí)時(shí)PCRHPV16E2、E6的標(biāo)準(zhǔn)曲線擴(kuò)增效率均在96％以上，相關(guān)系數(shù)均在0.99以上，線性關(guān)系良好。20個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品E2/E6比值95%可信區(qū)間是[0.81,1.20]。0.81作為臨界值區(qū)分HPV16存在狀態(tài)：整合型：E2/E6=0;游離型：E2/E6>0.81;混合型：0

4、N,CINI,CINII/III,SCC中，HPV16游離型、混合型、整合型的百分比分別為[80%,20%,0]，[59.4%,40.6%,0],[30.8%,65.4%,3.8%],[20.5%,72.7%，6.8%]；漢族N,CINI,CINII/III,SCC中，HPV16游離型、混合型、整合型的百分比分別為[68.2%,31.9%,0]，[59%,50%,0],[25.7%,71.4%,2.9%],[23.3%,70%，6.7%

5、]。維、漢各民族內(nèi)，在不同級(jí)別的宮頸病變中HPV16存在類(lèi)型的分布有顯著性差異（秩和檢驗(yàn)，均有p<0.05），并且隨診宮頸病變程度加重，HPV16游離型越來(lái)越少，整合比率（混合型和整合型所占的比例）越來(lái)越高。但是同級(jí)別宮頸病變組，維、漢患者HPV16整合比率無(wú)顯著性差異（χ2檢驗(yàn)，p>0.05）。4.維族N,CINI,CINII/III,SCC中，HPV16E2基因的整合率（1-E2/E6）均數(shù)分別為0.16,0.27,0.37,0.4

6、1；漢族N,CINI,CINII/III,SCC中，HPV16E2基因的整合率均數(shù)分別為0.13,0.23,0.32,0.51。在兩民族各組中整合率的分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（秩和檢驗(yàn)，p>0.05），但維漢合為一樣本總體時(shí)，有顯著性差異（秩和檢驗(yàn)，p=0.02），且隨著病變程度的加重，整合率逐漸增大。
　　結(jié)論：1.多重實(shí)時(shí)PCR是一種靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的HPV16存在狀態(tài)的檢測(cè)方法。2.HPV16E2整合是促進(jìn)新疆維、漢宮頸