蜀葵組織培養(yǎng)及其天然活性物質(zhì)含量研究.pdf

1、蜀葵，為錦葵科蜀葵屬多年生草本植物，花顏色亮麗，對(duì)二氧化硫、氯化氫等具有較強(qiáng)的抗性，是優(yōu)良的城市景觀植物。蜀葵全株入藥，蜀葵的根、莖、葉、花富含植物多糖和黃酮類(lèi)物質(zhì)，具有極大的藥用價(jià)值。本文試圖通過(guò)組織培養(yǎng)手段，探究蜀葵花藥培養(yǎng)的條件、單倍體的制備、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)、不定根培養(yǎng)、誘導(dǎo)子條件對(duì)其生長(zhǎng)和主要次生代謝產(chǎn)物含量的影響，為工業(yè)化開(kāi)發(fā)利用蜀葵積累基本參數(shù)。
　　花藥培養(yǎng)制備愈傷組織發(fā)現(xiàn)，蜀葵花藥消毒的最佳條件為使用4％的次氯酸鈉浸

2、泡20 min;最佳的誘導(dǎo)激素配比和濃度為1.5 mg/L的6-BA、2 mg/L的2，4-D和1 mg/L的NAA;最佳的蔗糖濃度為30 g/L;最佳的培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)愈傷細(xì)胞的倍性發(fā)現(xiàn)，大部分的愈傷組織均為單倍體細(xì)胞和二倍體細(xì)胞的混合體。利用所得的愈傷懸浮培養(yǎng)并建立懸浮培養(yǎng)體系，發(fā)現(xiàn)其生長(zhǎng)曲線(xiàn)呈S型變化，pH和電導(dǎo)率整體呈下降趨勢(shì)。
　　利用蜀葵的幼莖誘導(dǎo)不定根最佳的誘導(dǎo)激素濃度為2 mg/L的IBA。蜀

3、葵不定根進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其生長(zhǎng)曲線(xiàn)類(lèi)似于S型變化，pH值和電導(dǎo)率整體呈下降趨勢(shì)。
　　誘導(dǎo)子實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，茉莉酸甲酯和水楊酸均抑制蜀葵懸浮細(xì)胞和不定根生長(zhǎng)，低濃度的酵母提取物對(duì)其生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用。茉莉酸甲酯對(duì)其糖醛酸含量沒(méi)有影響，而水楊酸和酵母提取物均對(duì)其糖醛酸含量有一定促進(jìn)作用，分別在濃度為5mg/L、1g/L時(shí)達(dá)到最大，酵母提取物效果更好，分別是對(duì)照的1.47倍和1.38倍，達(dá)到了47.53mg/g和75.34mg/g，

4、水楊酸次之，分別是對(duì)照的1.34和1.27倍，達(dá)到了43.57mg/g和67.94mg/g;三種誘導(dǎo)子均對(duì)總黃酮含量有促進(jìn)作用，分別0.2 mg/L、1 mg/L、0.1g/L時(shí)達(dá)到最大，其中以茉莉酸甲酯效果最好，分別提高了1.64倍和1.70倍，達(dá)到了8.91mg/g和10.95mg/g;水楊酸次之，分別提高了1.52倍和1.58倍，達(dá)到了8.26mg/g和10.19mg/g;酵母提取物最次，分別提高了1.40倍和1.38倍，達(dá)到了7