宣木瓜組織培養(yǎng)及其影響因子的研究.pdf

1、本論文以宣木瓜的種子為材料，進(jìn)行了組織培養(yǎng)和耐鹽性?xún)蓚€(gè)方面的實(shí)驗(yàn)。 1．組織培養(yǎng)方面的主要結(jié)論如下： 1．1不定芽快速繁殖、誘導(dǎo)生根： 與KT和TDZ相比，BA對(duì)不定芽增殖具有更好的效果。NAA與IBA兩種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)不定芽增殖的影響沒(méi)有明顯的差異。木瓜不定芽在BA0.5 mg/l+NAA0.2 mg/l培養(yǎng)基中，增殖系數(shù)最高。降低MS大量元素對(duì)不定芽增殖具有負(fù)作用。在1/2MS+IBA0.2組合中，不定芽的根

2、誘導(dǎo)率較高、根較長(zhǎng)。 1．2愈傷組織的誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)： 1．2．1愈傷組織的誘導(dǎo)①在子葉誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中，2，4-D能比NAA更高效的誘導(dǎo)出愈傷組織，愈傷生長(zhǎng)量大，而且經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)后仍能保持較好的長(zhǎng)勢(shì)。2，4-D與KT組合的效果好于2，4-D與BA的組合。篩選試驗(yàn)表明：MS+2，4-D1 mg/l+KT0.1 mg/l對(duì)子葉愈傷誘導(dǎo)及其生長(zhǎng)效果較好。②胚軸愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)到87％，而子葉較低為69％。雖然NAA誘導(dǎo)的效果較好，

3、但愈傷組織生長(zhǎng)速度較慢；而2，4-D則能高效地誘導(dǎo)出愈傷，但所誘導(dǎo)的愈傷容易出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象。提高NAA，2，4-D和BA的濃度，．愈傷呈現(xiàn)水浸狀的比例和程度都會(huì)相應(yīng)的提高。所設(shè)計(jì)的組合中，2，4-D0.1 mg/l+BA 0.3 mg/l對(duì)胚軸愈傷的誘導(dǎo)效果較好。③暗培養(yǎng)能提高愈傷組織的生長(zhǎng)量．隨著黑暗培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，愈傷組織松散程度也不斷上升，子葉顏色由濃綠色逐步向淡黃色過(guò)渡。 1．2．2愈傷組織的繼代培養(yǎng)①在固體培養(yǎng)基中，子

4、葉愈傷組織繼代培養(yǎng)可以根據(jù)目的不同選取不同的繼代培養(yǎng)基。長(zhǎng)期繼代培養(yǎng)，將愈傷組織繼代培養(yǎng)在NAA1.0mg/l+KT0.5mg/l的培養(yǎng)基或NAA0.5 mg/l與TDZ 2mg/l的組合中，可得到較好的效果。如需短期內(nèi)獲得較多的愈傷組織，可將愈傷組織在2，4-D1.0mg/l+KT0.1 mg/l中培養(yǎng)。②子葉愈傷在液體培養(yǎng)條件下，生長(zhǎng)量較低，效果較差。③胚軸愈傷在NAAlmg/l+KT0.3mg/l培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)量最大。④維生素C對(duì)

5、愈傷組織降低褐化的作用較小，但能促進(jìn)愈傷組織變綠。 1．3不定芽的誘導(dǎo)發(fā)生： 子葉誘導(dǎo)不定芽的培養(yǎng)基中需要添加一定量的TDZ和NAA。不定芽有玻璃化現(xiàn)象，在TDZ 0.5 mg/l+NAA 1.0mg/l的培養(yǎng)基中得到的不定芽發(fā)育較好。 2．不同NaCl濃度對(duì)種子和愈傷組織的生長(zhǎng)的影響，主要結(jié)論如下： 2．1愈傷組織： 當(dāng)NaCl濃度較低時(shí)，愈傷組織的生長(zhǎng)量未受到較大影響、MDA含量較低，POD、

6、SOD活性提高，細(xì)胞內(nèi)可溶性糖、脯氨酸含量升高。而在高濃度NaCl的脅迫下，愈傷組織的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用、MDA含量升高，而POD、SOD活性開(kāi)始降低、可溶性糖含量也降低，但是脯氨酸含量一直升高。 2．2幼苗隨著NaCl濃度的升高，種子的萌發(fā)率和幼苗根系活力呈遞減趨勢(shì);除了在0.5％oNaCl處理的幼苗中，其葉綠素含量高于對(duì)照，其余處理均低于對(duì)照；幼苗的SOD、POD活性變化趨勢(shì)較一致，先升高后降低，在1‰NaCl濃度具有