Pit-1 siRNA對大鼠垂體瘤GH3細胞遷移與侵襲行為的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:利用體外化學合成siRNA技術(shù)沉默pit-1基因的表達,研究其對大鼠垂體瘤GH3細胞遷移和侵襲性的影響,為侵襲性垂體瘤的發(fā)病機制基因治療提供實驗和理論基礎(chǔ)。
  方法:根據(jù)大鼠垂體瘤GH3細胞的pit-1基因序列,設(shè)計合成pit-1-siRNA及隨機陰性對照siRNA NC。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pit-1-siRNA經(jīng)LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染大鼠垂體瘤GH3細胞24h后,應(yīng)用Western blot、RT-P

2、CR檢測pit-1在大鼠垂體瘤GH3細胞中的蛋白及mRNA的表達變化,進而檢驗pit-1基因的沉默效果。細胞劃痕實驗及Transwell遷移實驗檢測pit-1-siRNA對GH3細胞遷移能力的影響。Transwell侵襲實驗檢測pit-1-siRNA對GH3細胞侵襲能力的影響。
  結(jié)果:pit-1-siRNA成功轉(zhuǎn)染大鼠垂體腺瘤GH3細胞24h后,pit-1 mRNA及蛋白的表達水平明顯低于陰性對照組(P<0.05)。與對照組相

3、比,細胞劃痕實驗及Transwell遷移實驗顯示:pit-1-siRNA組細胞遷移能力較陰性對照組明顯降低(P<0.05)。Transwell侵襲實驗顯示:與陰性對照組相比,pit-1-siRNA組穿過Matrigel基質(zhì)膠及濾膜的細胞數(shù)明顯減少(P<0.05)。
  結(jié)論:利用體外化學合成siRNA技術(shù)沉默pit-1基因可以降低大鼠垂體瘤GH3細胞pit-1的表達,抑制GH3細胞的遷移及侵襲能力,pit-1在大鼠垂體瘤GH3細胞

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