植物甾醇酯的酶促合成及其對(duì)高脂血癥大鼠血脂代謝的影響.pdf

1、植物甾醇是一類存在于植物體內(nèi)的天然生物活性成分，主要通過抑制膳食和膽汁中的膽固醇在腸道內(nèi)的吸收從而達(dá)到降膽固醇的效果，由于游離的植物甾醇在水和油脂中的低溶解性，限制了其實(shí)際應(yīng)用范圍。研究發(fā)現(xiàn)酯化后的植物甾醇酯，可大大增加植物甾醇的溶解性，能比較方便地添加到油脂類食品中。目前，植物甾醇酯的合成主要有化學(xué)法和酶法，與化學(xué)法相比，酶法具有反應(yīng)條件溫和，高效專一，副反應(yīng)較少，產(chǎn)物質(zhì)量好并易于純化分離等優(yōu)勢(shì)。本文選擇酶法催化合成植物甾醇酯，改進(jìn)植

2、物甾醇酯的分離提純方法，獲得高純度產(chǎn)品；以不同植物甾醇酯產(chǎn)品，進(jìn)行等劑量高脂血癥大鼠的血脂代謝影響研究，探索植物甾醇酯降低高脂血癥的作用效果。主要研究結(jié)果如下：
　　(1)研究了脂肪酶催化植物甾醇和油酸反應(yīng)合成植物甾醇油酸酯。運(yùn)用中心組合設(shè)計(jì)，以酯化率為考察指標(biāo)，對(duì)脂肪酶Candida rugosa催化合成植物甾醇油酸酯進(jìn)行了優(yōu)化研究。通過甾醇酯化率的響應(yīng)面分析，研究了反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、底物摩爾比(油酸：植物甾醇)和加酶量及其交

3、互作用對(duì)酯化反應(yīng)的影響，構(gòu)建了相應(yīng)的回歸模型，并進(jìn)行了驗(yàn)證，結(jié)果表明：反應(yīng)溫度41℃，反應(yīng)時(shí)間19h，底物摩爾比2.4:1，加酶量7%為最佳條件，酯化率可達(dá)77.43%。
　　(2)采用薄層色譜法(TLC)、紫外光譜法(UV-VIS)、紅外光譜法(FT-IR)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)，對(duì)甾醇酯進(jìn)行了有效的檢測(cè)分析及結(jié)構(gòu)表征。TLC、UV-VIS、FT-IR法可以判斷反應(yīng)產(chǎn)物中基本不含甾醇，形成酯鍵。GC-MC檢測(cè)分析證

4、明反應(yīng)產(chǎn)物主要為β-谷甾醇酯、豆甾醇酯、菜油甾醇酯以及少量的菜籽甾醇酯；進(jìn)而對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分離提純，經(jīng)GC檢測(cè)甾醇酯純度達(dá)91.2%。
　　(3)以植物甾醇油酸酯和亞油酸酯對(duì)高脂血癥大鼠的血脂代謝影響進(jìn)行研究。在建立高脂血癥大鼠模型基礎(chǔ)上，分組給予高/低劑量的兩種甾醇酯，干預(yù)6周后，測(cè)定結(jié)果表明，兩種甾醇酯均具有降血脂作用，能顯著降低大鼠血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和載脂蛋白ApoB，升高高密度脂蛋白膽固醇(