SCF對高糖環(huán)境下膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)及電生理功能的影響.pdf

1、目的：觀察干細(xì)胞因子(stem cell factor，SCF)干預(yù)后高糖環(huán)境下豚鼠膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞（interstitial cells of Cajal，ICCs)形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)及電生理的變化，探討SCF對高糖環(huán)境下豚鼠膀胱ICCs樣細(xì)胞的影響。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用膠原酶酶解法分離、培養(yǎng)豚鼠膀胱ICCs樣細(xì)胞，分為正常對照組（葡萄糖濃度為5mmol/L）、高糖組（葡萄糖濃度為15mmol/L和30mmol/L），

2、培養(yǎng)基培養(yǎng)72h后高糖組分為高糖對照組、SCF50ng/mL組、SCF100ng/mL組，繼續(xù)培養(yǎng)24h及72h。采用透射電鏡觀察各組不同時(shí)間段ICCs樣細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化；采用激光掃描共聚焦顯微鏡測量各組不同時(shí)間段ICCs樣細(xì)胞長度并記錄細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度值的變化。
　　 結(jié)果：隨著培養(yǎng)時(shí)間延長，通過透射電鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡觀察顯示正常對照組ICCs樣細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)、鈣離子熒光值及細(xì)胞長度無明顯差異。15mmol/L高

3、糖組：高糖對照組較正常對照組ICCs樣細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器數(shù)量明顯減少，線粒體腫脹、大小不等、空泡樣變甚至溶解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，胞質(zhì)廣泛溶解，胞周突起變短乃至消失，細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值顯著降低、細(xì)胞長度明顯縮短（P<0.01）。SCF組隨著培養(yǎng)時(shí)間延長及SCF濃度增加，ICCs樣細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)得到逐步改善，細(xì)胞器數(shù)量增多、形態(tài)趨于正常對照組，胞周突起增多。SCF50ng/mL作用24h后ICCs樣細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值及細(xì)胞長度較高糖對照組無差異（P>0.

4、05），SCF50ng/mL作用72h后細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值較高糖對照組增高（P<0.05），SCF 100ng/mL作用24h后較高糖對照組細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值增高、細(xì)胞長度增長（P<0.05），SCF 100ng/mL作用72h后細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值較高糖對照組顯著增高、細(xì)胞長度明顯增長（P<0.01）。30mmol/L高糖組：高糖對照組較15mmol/L高糖對照組細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器數(shù)量進(jìn)一步減少，線粒體腫脹、溶解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張明顯，胞質(zhì)廣泛溶解

5、、大量空泡形成，胞周突起消失。與正常對照組比較，細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值顯著降低、細(xì)胞長度明顯縮短（P<0.01）。SCF組ICCs樣細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)較高糖對照組改變不明顯,SCF50ng/mL作用24h及72h和SCF100ng/mL作用24h后ICCs樣細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值及細(xì)胞長度較高糖對照組無差異（P>0.05），SCF100ng/mL作用72h后鈣離子熒光值較高糖對照組增高（P<0.05）。
　　 結(jié)論：外源性SCF干預(yù)后對高糖環(huán)