高糖環(huán)境對豚鼠膀胱Cajal樣細胞形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：通過觀察高糖環(huán)境下豚鼠膀胱 Cajal 樣間質(zhì)細胞 (interstitial cells of Cajal，ICCs) 形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)的變化，探討高糖環(huán)境對豚鼠膀胱Cajal 樣間質(zhì)細胞的影響。
　　 方法：酶消化法原代培養(yǎng)豚鼠膀胱Cajal 樣間質(zhì)細胞，采用透射電鏡觀察在不同葡萄糖濃度（5、10、15mmol/L）不同時間段 （24、72h） 體外培養(yǎng)的ICCs 樣細胞的超微結(jié)構(gòu)；采用激光共聚焦顯微鏡成像技術(shù)測量 Fl

2、uo-4AM 負載后的Cajal 樣間質(zhì)細胞長度并記錄其胞內(nèi)鈣離子熒光強度的變化。
　　 結(jié)果：透射電鏡觀察到隨糖濃度增高和培養(yǎng)時間延長，ICCs樣細胞內(nèi)細胞器明顯減少，線粒體大小不等，數(shù)量減少，腫脹、空泡樣改變甚至溶解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張、空泡樣變，胞質(zhì)廣泛溶解，突起消失；電鏡下還觀察到部分膀胱Cajal 樣細胞間具有細胞間橋樣結(jié)構(gòu)；高濃度長時間培養(yǎng)下的Cajal 樣細胞染色后出現(xiàn)染色深淺不同的兩類細胞，染色淺的細胞中出現(xiàn)微絲素成份，

3、而染色深的細胞則出現(xiàn)了細胞液化壞死。運用激光共聚焦顯微鏡成像技術(shù)連續(xù)掃描和測量 Cajal 樣細胞長度，見體外原代培養(yǎng)的膀胱 Cajal 樣間質(zhì)細胞隨糖濃度增高，ICCs樣細胞內(nèi)鈣離子熒光值：5mmol/L/24h組和5mmol/L/72h組并無明顯差別；與 5mmol/L/24h 組相比，10mmol/L/24h組是升高的，而 15mmol/L/24h 組則降低；10mmol/L72h 組和 15mmol/L/72h 組都是升高的，但

4、 15mmol/L/72h 組較 10mmol/L/72h 組低，開始出現(xiàn)下降趨勢。ICCs 樣細胞長度：5mmol/L/24h 組和 5mmol/L/72h 組并無明顯差別；24h 組隨糖濃度增高，10mmol/L 組和15mmol/L 組 ICCs 樣細胞長度逐漸縮短；72h 組隨糖濃度增高 10mmol/L/72h 組細胞長度增長，而15mmol/L/72h 組細胞縮短。
　　 結(jié)論：高糖環(huán)境可對豚鼠膀胱Cajal 樣間質(zhì)