我國(guó)部分水稻白葉枯病菌對(duì)轉(zhuǎn)Xa21基因水稻的致病力比較及其PCR鑒別.pdf

1、在溫室和田間評(píng)價(jià)了我國(guó)部分水稻白葉枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae,Xoo)對(duì)轉(zhuǎn)Xa21基因水稻育種系列(包括不育系、保持系和雜交稻)的致病力；初步研究了田間條件下我國(guó)水稻白葉枯病菌7個(gè)致病型標(biāo)準(zhǔn)菌株C1-C7對(duì)分別處于分蘗初期和分蘗盛期的轉(zhuǎn)Xa21基因水稻的致病力；本研究初步建立了我國(guó)水稻白葉枯病菌不同致病型菌株的PCR鑒別方法。 采用剪葉接種法在溫室和田間評(píng)價(jià)了C1-C7菌株、安徽Ⅲ型標(biāo)準(zhǔn)菌株A3

2、、湖北Ⅱ型和Ⅳ型標(biāo)準(zhǔn)菌株WHⅡ和WHⅣ、湖北武漢田間分離菌株WH01-WH10和安徽合肥田間分離菌株HF004等20個(gè)Xoo菌株對(duì)轉(zhuǎn)Xa21基因水稻育種系列(保持系皖21B、不育系皖21A和雜交稻抗優(yōu)97)和相應(yīng)的非轉(zhuǎn)基因水稻育種系列(保持系80-4B、不育系80-4A和雜交稻80優(yōu)98)以及常規(guī)雜交稻汕優(yōu)63等7個(gè)水稻品種的致病力。初步研究結(jié)果顯示，與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ障啾?，轉(zhuǎn)Xa21基因水稻對(duì)C1-C7菌株和HF004菌株表現(xiàn)出良好的抗性

3、，但對(duì)WH01-WH10菌株均表現(xiàn)為感病，甚至高度感病。轉(zhuǎn)Xa21基因雜交稻抗優(yōu)97對(duì)C1-C7菌株的抗性略低于轉(zhuǎn)Xa21基因保持系皖21B和轉(zhuǎn)Xa21基因不育系皖21A。此外還發(fā)現(xiàn)，非轉(zhuǎn)基因雜交水稻汕優(yōu)63對(duì)我國(guó)XooⅥ型代表菌株C6具有良好的抗性。 本文初步研究了田間條件下C1-C7菌株對(duì)分別處于分蘗初期和分蘗盛期的轉(zhuǎn)Xa21基因水稻的致病力。結(jié)果表明，與非轉(zhuǎn)基因水稻相比，3個(gè)轉(zhuǎn)Xa21基因水稻對(duì)C1-C7菌株均表現(xiàn)出良好的

4、抗性。接種C1-C7菌株后，轉(zhuǎn)基因雜交稻抗優(yōu)97的病情指數(shù)略高于轉(zhuǎn)基因水稻保持系皖21B和不育系皖21A，但彼此之間沒(méi)有顯著差異，表明外源基因Xa21在不同的育種品系中均能很好地表現(xiàn)出對(duì)這7個(gè)菌株的抗性。 利用基于水稻白葉枯菌特有的插入序列IS1112設(shè)計(jì)的引物J3對(duì)C1-C7菌株進(jìn)行IS-PCR擴(kuò)增，在對(duì)擴(kuò)增指紋圖譜進(jìn)行分析的基礎(chǔ)上，測(cè)定和分析了C2和C5菌株的10個(gè)特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的序列，提交GenBank中進(jìn)行比對(duì)。利用基于

5、其中6個(gè)含有IS1112相應(yīng)序列的產(chǎn)物序列結(jié)構(gòu)和已公布的Xoo全基因組序列設(shè)計(jì)特異性引物擴(kuò)增C1-C7菌株，從中篩選到2對(duì)具有較好鑒別能力的引物2-3F/2-3R和5-4F/5-4R，擴(kuò)增產(chǎn)物因是否存在IS1112序列而表現(xiàn)出長(zhǎng)度的多樣性。根據(jù)兩對(duì)引物的PCR擴(kuò)增結(jié)果將C1-C7菌株分為3類(lèi)，其中C1和C4菌株為第Ⅰ類(lèi)，C2、C3、C6和C7菌株為第Ⅱ類(lèi)，C5菌株為第Ⅲ類(lèi)。利用這2對(duì)引物將從湖北武漢地區(qū)分離的10個(gè)Xoo菌株和安徽合肥地