短期急性寒冷暴露對(duì)高鹽高血壓SD大鼠氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響及其性別差異.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)建立高鹽高血壓SD大鼠動(dòng)物模型,觀察短期急性寒冷暴露環(huán)境對(duì)動(dòng)物模型氧化應(yīng)激態(tài)的影響及其雌雄差異,探討寒冷環(huán)境所致氧化應(yīng)激對(duì)血壓影響的機(jī)制。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)分組:
　　 雌雄SD大鼠各16只,體重250-300g,隨機(jī)分為4組(n=8):1.雄性對(duì)照組(MC):常規(guī)喂養(yǎng)；2.雌性對(duì)照組(FC):常規(guī)喂養(yǎng)；3.雄性高鹽組(MS):含8％食鹽飼料喂養(yǎng)；4.雌性高鹽組(FS):含8％食

2、鹽飼料喂養(yǎng)。為期8周。從第9周始停止雄性高赫組及雌性高鹽組8％食鹽飼料喂養(yǎng),四組SD大鼠均常規(guī)喂養(yǎng)1周；于第10周開(kāi)始將四組SD大鼠每日置于4℃人工氣候箱1小時(shí),為期1周。
　　 標(biāo)本采集:
　　 血壓:實(shí)驗(yàn)前1周開(kāi)始測(cè)量血壓,第1周至第9周前4日采用尾套法隔日測(cè)定各組SD大鼠收縮壓(SBP),測(cè)量三次取其平均值。第9周后3日、第10周采用尾袖法每日測(cè)定各組SD大鼠收縮壓,測(cè)量三次。
　　 尿液:于實(shí)驗(yàn)第8周末、

3、第9周末、第10周末利用生物代謝籠收集各組SD大鼠24小時(shí)尿液,準(zhǔn)確計(jì)量,混勻后取5ml于離心管內(nèi),-20℃保存。
　　 第9周末,各組SD大鼠尾靜脈穿刺取血1ml；第10周末,全部SD大鼠在全麻下,于頸總動(dòng)脈處穿刺插管取血離心后獲得血清,留取胸主動(dòng)脈,于液氮中保存。待測(cè)組織勻漿,并檢測(cè)組織蛋白定量。
　　 觀察指標(biāo):
　　 血壓:前8周每周收縮壓(SBP)、第9周第1、3、5、6、7日收縮壓(SBP)及第10周

4、每日收縮壓(SBP),并計(jì)算第10周寒冷暴露前后血壓差值。
　　 尿液:尿微量白蛋白(mALB)、視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)、鈉(Na+)和鉀(K+)濃度,計(jì)算24h尿mALB、RBP、Na+和K+排出量。ELISA法測(cè)定8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)濃度。
　　 血清:ELISA法測(cè)定血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的濃度、硝酸鹽還原酶法測(cè)定一氧化氮(NO)濃度。
　　 胸主動(dòng)脈:比色法測(cè)定NADPH氧化

5、酶活性(NADPH oxidase activity)及總超氧化物歧化酶(SOD)活性。
　　 結(jié)果：
　　 1.SBP變化:
　　 高鹽飲食8周后,與對(duì)照組相比,雄性高鹽組及雌性高鹽組血壓明顯高于同性別對(duì)照組(P<0.05)。從第10周寒冷暴露后四組血壓(BP)均有升高,MS組暴露前后血壓差值ΔBP(ΔBP=暴露后BP-暴露前BP)明顯大于MC組△BP(P<0.01)；FS組ΔBP明顯大于FC組ΔBP(P<0.

6、01)。
　　 2.24h尿微量白蛋白(mALB)、視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)、Na+和K+排出量的測(cè)定:
　　 第8周末時(shí)雄性高鹽組及雌性高鹽組24h尿量、尿mALB、尿RBP、尿鈉、尿鉀排出量均較同性別對(duì)照組明顯升高；寒冷暴露前雄性及雌性高鹽組24h尿量、尿mALB、尿RBP、尿鈉、尿鉀排出量與8周末同組間比較明顯降低；寒冷暴露后雄性及雌性高鹽組24h尿mALB、尿RBP、尿鈉、尿鉀排出量與寒冷暴露前比較無(wú)明顯變化,8

7、周末、寒冷暴露前后均未表現(xiàn)出性別差異。
　　 3.各組大鼠24h尿8-iso-PGF2α的比較:
　　 寒冷暴露后高鹽組24h尿8-iso-PGF2α排出量較寒冷暴露前顯著升高
　　 (P<0.01),對(duì)照組寒冷暴露前后24h尿8-iso-PGF2α排出量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。寒冷暴露前、后24h尿8-iso-PGF2α排出量雄性高鹽組與雌性高鹽組、雄性對(duì)照組與雌性對(duì)照組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4.血清中An

8、gⅡ和NO濃度:
　　 寒冷暴露后高鹽組血清AngⅡ較寒冷前升高、NO濃度降低(P<0.05),對(duì)照組寒冷前后血清AngⅡ及NO濃度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。寒冷前、后血清AngⅡ及NO濃度在雄性高鹽組與雌性高鹽組、雄性對(duì)照組與雌性對(duì)照組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 5.胸主動(dòng)脈NADPH氧化酶活性(NADPH oxidase activity)及總超氧化物歧化酶(SOD)活性:
　　 寒冷暴露后NADPH氧化酶活性及SOD活

9、性,雄性與雌性高鹽組比較、雄性與雌性對(duì)照組比較未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但不同性別的高鹽組均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.高鹽飲食引起血壓升高且高鹽飲食后高鹽高血壓大鼠血壓出現(xiàn)性別差異；恢復(fù)普通飲食高鹽高血壓大鼠血壓下降,腎功能得到一定恢復(fù),但高鹽高血壓大鼠血壓仍存在性別差異。
　　 2.與同性別對(duì)照組比較,短期急性寒冷暴露可使高鹽高血壓大鼠模型血壓明顯升高；
　　 3.寒冷暴露后高鹽